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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 关于gateway技术求师兄师姐解答
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15927635384

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于gateway技术求师兄师姐解答

在转基因的实验中，我们先是通过gateway技术构建超表达载体，问题如下：在gateway技术中先是要热激转化大肠杆菌，再电转农杆菌，我想问一下为什么不可以直接电转农杆菌，而是要经过热激大肠杆菌？？？？？？？
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1楼 2015-08-05 08:36:17
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半醒半梦

铜虫 (小有名气)
转大肠是因为转化效率高，转大肠后应进行PCR检测和测序，正确后转弄杆菌，弄杆菌质粒不好提，转化效率相对也低。

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15927635384
13楼2015-08-22 19:24:51
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15927635384

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
13楼: Originally posted by 半醒半梦 at 2015-08-22 19:24:51
转大肠是因为转化效率高，转大肠后应进行PCR检测和测序，正确后转弄杆菌，弄杆菌质粒不好提，转化效率相对也低。

谢谢😊

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14楼2015-08-23 08:45:51
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chengyihui

新虫 (初入文坛)
大肠杆菌容易测序
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15楼2015-12-10 11:06:31
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liguanying

银虫 (初入文坛)
亲，ccdB基因对农杆菌是非致死的，如果直接转农杆菌，没有经过重组的空载体，也会在平板上长出来，这样将会很难筛选；前几年看过一篇文献，好像讲一个对农杆菌、E.coli都能致死的基因，如果用在Gateway载体中将可以直接转化农杆菌。
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16楼2015-12-18 17:14:38
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
质粒在大肠杆菌中是多拷贝，在农杆菌中不是
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17楼2015-12-18 22:17:17
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readytogo2楼
2015-08-05 08:50   回复  
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dmbb3楼
2015-08-05 08:57   回复  
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sgirld4楼
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Biotage5楼
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jianing1196楼
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xiaomaya20467楼
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sz_kebaoyuan8楼
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小蚂蚁19979楼
2015-08-05 09:23   回复  
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tzynew10楼
2015-08-05 09:26   回复  
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nono200911楼
2015-08-05 09:34   回复  
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肖吉_201412楼
2015-08-21 15:16   回复  
，，， [ 发自小木虫客户端 ]
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