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akangln

木虫 (著名写手)

[交流] 求助:SDS-PAGE电泳时条带发生倾斜

SDS-PAGE电泳时条带发生倾斜,为什么会这样?
1.采用梯度胶做的,分离胶浓度8%~16%
2.跑时为恒流10mA

[ Last edited by akangln on 2008-8-14 at 11:17 ]
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biogefart

木虫 (著名写手)

解决办法

★ ★
akangln(金币+2,VIP+0):谢谢!
1.脱盐
2.低电压 12V/cm
闹太套
2楼2008-08-14 11:02:46
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qfzhang

银虫 (小有名气)

★
akangln(金币+1,VIP+0):谢谢!好像不是这个原因
电泳槽放的不稳,放稳就好了
3楼2008-08-14 11:04:36
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akangln

木虫 (著名写手)

熟悉SDS-PAGE的朋友请帮忙分析分析啊,焦急等待中!
4楼2008-08-14 13:39:52
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chysx6

铁杆木虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
从电泳图中可以看出蛋白带迁移速度不同

可能的原因:
电场不均匀,仔细检查电泳槽中铂丝是否发生弯曲
电泳槽上部电极是否插稳
电泳液是否充足
5楼2008-08-14 14:52:45
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biogefart

木虫 (著名写手)

另外。。

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
胶是自己配的还是买的?
以前自己配的时候经常出现这种情况,因为灌胶时分配不均匀。看你这种情况很像。另外,上面的解释没有看见你的图,可能不是盐和电压的问题。

[ Last edited by biogefart on 2008-8-14 at 16:32 ]
闹太套
6楼2008-08-14 16:30:51
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jasco

木虫 (正式写手)

★
reasonspare(金币+1,VIP+0):thx
为什么不恒压跑?
7楼2008-08-14 17:27:12
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mark32280667806

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
做胶的时候,胶是用胶条封的还是用琼脂糖封的胶?
如果用了琼脂糖封胶,出现这样的原因是,琼脂糖占据了胶的空间,
如果没有用琼脂糖封胶,则可能是胶的密度不均匀,也有可能是电流,缓冲液的问题。
8楼2008-08-14 20:08:47
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deity214

铁虫 (小有名气)

★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复,欢迎常来
有时候电泳仪老化或者铂丝有那种蓝色的绣往往会跑偏,因为这种情况电流不均。可以用镊子将绣刮出
9楼2008-08-15 17:12:41
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