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杏林湾畔

金虫 (初入文坛)

[求助] 新人请教几个纯菌培养方面的问题,谢谢! 已有5人参与

刚接触微生物方面,有几个纯菌培养的问题,请前辈解答,谢谢!
    1,保存在平板上的纯菌,要怎么转移到液态培养基里做摇瓶实验呢?
    2,做微生物生长曲线的时候,OD600是用分光光度计测比较好,还是用酶标仪测比较好呢?如果用分光光度计来测,那测量完的样品还要倒回摇瓶中么?(因为担心分光光度计需要的液体体积较多)
    谢谢!若还有其他的纯菌摇瓶方面的小巧么,也希望大家多多赐教
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

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感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励应助 2015-08-04 20:09:30
1用接种环转接。2一般用分光光度仪。测过后不能倒回去,会染杂菌。担心不够用大试管或三角瓶培养。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2015-08-04 19:23:30
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杏林湾畔

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaodahe at 2015-08-04 19:23:30
1用接种环转接。2一般用分光光度仪。测过后不能倒回去,会染杂菌。担心不够用大试管或三角瓶培养。

用接种环的话,接种的量要如何控制呢?谢谢。
3楼2015-08-04 20:51:09
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
杏林湾畔: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-08-06 09:00:11
引用回帖:
3楼: Originally posted by 杏林湾畔 at 2015-08-04 20:51:09
用接种环的话,接种的量要如何控制呢?谢谢。...

接种环没法控制接种量。要到液体种子控制吧。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2015-08-04 21:04:47
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csyhaoge

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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杏林湾畔: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2015-08-06 09:00:58
对于从平板转接至摇瓶,只需要一根灭过菌的接种环挑取单菌落至摇瓶即可,这是微生物实验操作的基本。
测定生长曲线的时候,OD600值用分光光度计即可,因为分光光度计操作简便,酶标仪也可,但其操作稍微复杂,且酶标仪上样量少,易引起误差。测量完的样品建议不倒回摇瓶,主要是因为易杂染菌。担心量少的话,测定生长曲线的时候可以把量加大点即可。
如果担心无法确定接种环接入量的情况下,可以先接入5ml试管中预培养,然后以预培养的菌作为母菌接入到摇瓶中,以便控制接入摇瓶菌的量。
5楼2015-08-05 00:06:55
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笑傲侠

金虫 (小有名气)

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感谢参与,应助指数 +1
杏林湾畔: 金币+1, 有帮助 2015-08-06 09:01:26
接种环可以转移培养,斜面培养基只适合菌种传代,不适合做发酵种,od600可以测,但浓度不宜过高。

[ 发自小木虫客户端 ]
知识是力量的倍增器!
6楼2015-08-05 00:12:24
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lesley1139

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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杏林湾畔: 金币+2, 有帮助 2015-08-06 09:01:50
1.灭菌后的接种环蘸取少量,这个量其实只要能保证有就够了,刚开始不熟练可以蘸到能看到接种环上有细菌——一点点白色,慢慢的再减,那玩意那么小,你轻轻蹭一下接种环上就有N多了,无菌环境下的操作在接种后作为优势菌或单一菌增数很快的。2.分光光度计不麻烦,用的多些,菌液是回不去了。
7楼2015-08-05 08:08:57
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lddmc

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
杏林湾畔: 金币+2, 有帮助 2015-08-06 09:01:59
1.纯菌直接用接种环挑到液体培养基就可以了,需要不同浓度的话再根据需要直接液体稀释。
2.最好用分光光度计,测过的就不要倒回去了,会污染的。
8楼2015-08-05 11:48:43
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专属cc

金虫 (小有名气)

楼上都说得比较清楚了,楼主可以采纳!!1.接种环挑取一点就够,转移到液体培养基,摇床培养。2.分光光度计可测,但测完之后就不用倒回了!    操作时 无菌操作,避免污染!
9楼2015-08-07 11:04:35
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