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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 新人请教几个纯菌培养方面的问题，谢谢！
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杏林湾畔

金虫 (初入文坛)

[求助] 新人请教几个纯菌培养方面的问题，谢谢！ 已有5人参与

刚接触微生物方面，有几个纯菌培养的问题，请前辈解答，谢谢！
    1，保存在平板上的纯菌，要怎么转移到液态培养基里做摇瓶实验呢？
    2，做微生物生长曲线的时候，OD600是用分光光度计测比较好，还是用酶标仪测比较好呢？如果用分光光度计来测，那测量完的样品还要倒回摇瓶中么？（因为担心分光光度计需要的液体体积较多）
    谢谢！若还有其他的纯菌摇瓶方面的小巧么，也希望大家多多赐教。
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1楼 2015-08-04 16:44:50
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励应助 2015-08-04 20:09:30
1用接种环转接。2一般用分光光度仪。测过后不能倒回去，会染杂菌。担心不够用大试管或三角瓶培养。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2015-08-04 19:23:30
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杏林湾畔

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaodahe at 2015-08-04 19:23:30
1用接种环转接。2一般用分光光度仪。测过后不能倒回去，会染杂菌。担心不够用大试管或三角瓶培养。

用接种环的话，接种的量要如何控制呢？谢谢。
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3楼2015-08-04 20:51:09
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
杏林湾畔: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-08-06 09:00:11
引用回帖:
3楼: Originally posted by 杏林湾畔 at 2015-08-04 20:51:09
用接种环的话，接种的量要如何控制呢？谢谢。...

接种环没法控制接种量。要到液体种子控制吧。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2015-08-04 21:04:47
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csyhaoge

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
杏林湾畔: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2015-08-06 09:00:58
对于从平板转接至摇瓶，只需要一根灭过菌的接种环挑取单菌落至摇瓶即可，这是微生物实验操作的基本。
测定生长曲线的时候，OD600值用分光光度计即可，因为分光光度计操作简便，酶标仪也可，但其操作稍微复杂，且酶标仪上样量少，易引起误差。测量完的样品建议不倒回摇瓶，主要是因为易杂染菌。担心量少的话，测定生长曲线的时候可以把量加大点即可。
如果担心无法确定接种环接入量的情况下，可以先接入5ml试管中预培养，然后以预培养的菌作为母菌接入到摇瓶中，以便控制接入摇瓶菌的量。
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5楼2015-08-05 00:06:55
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笑傲侠

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
杏林湾畔: 金币+1, ★有帮助 2015-08-06 09:01:26
接种环可以转移培养，斜面培养基只适合菌种传代，不适合做发酵种，od600可以测，但浓度不宜过高。

[ 发自小木虫客户端 ]
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知识是力量的倍增器！
6楼2015-08-05 00:12:24
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lesley1139

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
杏林湾畔: 金币+2, ★有帮助 2015-08-06 09:01:50
1.灭菌后的接种环蘸取少量，这个量其实只要能保证有就够了，刚开始不熟练可以蘸到能看到接种环上有细菌——一点点白色，慢慢的再减，那玩意那么小，你轻轻蹭一下接种环上就有N多了，无菌环境下的操作在接种后作为优势菌或单一菌增数很快的。2.分光光度计不麻烦，用的多些，菌液是回不去了。
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7楼2015-08-05 08:08:57
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lddmc

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
杏林湾畔: 金币+2, ★有帮助 2015-08-06 09:01:59
1.纯菌直接用接种环挑到液体培养基就可以了，需要不同浓度的话再根据需要直接液体稀释。
2.最好用分光光度计，测过的就不要倒回去了，会污染的。
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8楼2015-08-05 11:48:43
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专属cc

金虫 (小有名气)
楼上都说得比较清楚了，楼主可以采纳！！1.接种环挑取一点就够，转移到液体培养基，摇床培养。2.分光光度计可测，但测完之后就不用倒回了！    操作时 无菌操作，避免污染！
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9楼2015-08-07 11:04:35
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