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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 细菌通用引物27F和1492R
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haloarchaeon

金虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 取个什么名啊 at 2015-08-04 16:03:08
这对引物扩增出来的片段也是1500bp左右，这些引物有什么区别吗？...

我的意思是：27F，1541R扩增时，用PCR产物直接测序可以到1500bp，要是克隆测序，可以到1530bp左右，而用27F，1492R要短几十个bp。
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haloarchaeon
11楼2015-08-04 21:04:39
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取个什么名啊

木虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by haloarchaeon at 2015-08-04 21:04:39
我的意思是：27F，1541R扩增时，用PCR产物直接测序可以到1500bp，要是克隆测序，可以到1530bp左右，而用27F，1492R要短几十个bp。...

哦，谢谢，明白了

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12楼2015-08-04 21:26:35
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cosign

木虫 (正式写手)
咱们实验室53-55度之间都能P出来
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13楼2015-08-05 08:51:23
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取个什么名啊

木虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by cosign at 2015-08-05 08:51:23
咱们实验室53-55度之间都能P出来

你们做的时候退火温度是多少？做温度梯度吗？

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14楼2015-08-05 09:43:37
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ctt1984

木虫 (正式写手)

初学者
直接用50-55度即可，不必要纠结TM差值，很好做的。
实践证明理论只是理论
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好好做事，踏实做人！
15楼2015-08-05 11:10:18
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cosign

木虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 取个什么名啊 at 2015-08-05 09:43:37
你们做的时候退火温度是多少？做温度梯度吗？
...

不是梯度，53-55之间随意挑选个温度就行了
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16楼2015-08-05 18:38:08
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取个什么名啊

木虫 (正式写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by cosign at 2015-08-05 18:38:08
不是梯度，53-55之间随意挑选个温度就行了...

好的，谢谢

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17楼2015-08-06 06:20:10
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取个什么名啊

木虫 (正式写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by ctt1984 at 2015-08-05 11:10:18
直接用50-55度即可，不必要纠结TM差值，很好做的。
实践证明理论只是理论

谢谢

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18楼2015-08-06 06:20:40
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