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最近用在质粒上用双酶联接片段,但是一直出现空载。
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hanfeng244
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最近用在质粒上用双酶联接片段,但是一直出现空载。
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最近用在质粒上用双酶联接片段,但是一直出现空载。质粒和片段分别双酶切,然后切胶回收验证片段也没有错,转化平板也会长出菌落,但是质粒回收电泳结果一直是空载。片段就一直没有连上。各位大神,请问这其中有什么做错了的么?
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2015-08-03 10:33:50
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。确认质粒是否双酶切成功,载体别加太多
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2楼
2015-08-03 10:41:31
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jie123400
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质粒没切好,2个酶分开切做个小试看看
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3楼
2015-08-03 16:40:39
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你确定连上了?你确定你切开了?
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努力打败一切
4楼
2015-08-04 10:33:14
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酶切要彻底,特别是pcr的DNA片段,一定要彻底切开
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5楼
2015-08-04 13:01:21
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hanfeng244
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3楼
:
Originally posted by
jie123400
at 2015-08-03 16:40:39
质粒没切好,2个酶分开切做个小试看看
好的,我试试看,谢谢哈
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6楼
2015-08-05 09:41:33
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情毒之殇
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你确定质粒切开了?还有两个粘性末端是不是相同的?连接时质粒浓度高了也会自连
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我们的心是荒野还是沃土?!
7楼
2015-08-05 10:55:43
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