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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求指点一下，关于PCR的问题
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守护天使nxl

金虫 (小有名气)

[交流] 求指点一下，关于PCR的问题 已有4人参与

今天被老板训了一顿，因为跑PCR时没有将基因组DNA进行稀释，本人新手，请问，为什么一定要将DNA稀释后再跑PCR，DNA浓度高了不行吗？
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1楼 2015-08-01 20:28:40
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feng37ye

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
模板是有浓度的，只有浓度范围之内能p出来。模板浓度高会导致非特异性条带增多。一般情况是10-100ng

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2015-08-02 08:27:08
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
做实验就像做菜，成分组成、各成分的量、火候都是有要求的，掌握好了才能做出色香味俱全的菜。
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3楼2015-08-02 13:17:51
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wuwenmei

新虫 (小有名气)
DNA要稀释多少倍？？
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下雨天就算没有伞，我也要学会努力奔跑！
4楼2015-08-03 10:20:08
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love犬夜叉

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这个要看你目的片段的亮度，如果很亮的话，稀释50倍甚至是100倍是没问题的，如果不是很亮10倍30倍也可以，如果不太明显的话，就不要稀释了。过高浓度的模板会产生非特异性扩增
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justloveinuyasha
5楼2015-08-03 11:13:18
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