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关于氨基酸的洗脱问题
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先以一道题为例 将含有天冬氨酸(pI=2.98)、甘氨酸(pI=5.97)、苏氨酸(pI=6.53)、亮氨酸(pI=5.98)和赖氨酸(pI=9.74)的pH3.0柠檬酸缓冲液,加到预先同样缓冲液平衡过的Dowex-50强阳离交换树脂中,随后用该缓冲液洗脱此柱,并分别收集洗出液,这5种氨基酸将按什么次序洗脱下来?[Asp, Thr, Gly, Leu, Lys] 解:在pH3左右,氨基酸与阳离子交换树脂之间的静电吸引的大小次序是碱性氨基酸(A2+)﹥中性氨基酸(A+)﹥酸性氨基酸(A0)。因此氨基酸的洗出顺序大体上是酸性氨基酸、中性氨基酸,最后是碱性氨基酸,由于氨基酸和树脂之间还存在疏水相互作用,所以其洗脱顺序为:Asp, Thr, Gly, Leu, Lys。 不知道具体如何判断,尤其是氨基酸和树脂之间的疏水相互作用,它是如何影响洗脱顺序的? 望各位前辈指教,谢谢! [ Last edited by zhangwj on 2008-12-20 at 01:52 ] |
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