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斌猫斌喵喵

铁虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE一个奇怪的现象,没找到过同类的...... 已有2人参与

这个胶片为什么溴酚蓝前沿会出现了两条?一直都是按照同样的方式跑的,电泳缓冲液都是一次性使用的。但偶尔就会出现这个问题,虽然结果没怎么受影响,但这不好说明了。关键是通电的时候明明就是一条蓝色的带的,染色后却变成了两条............

另外图上左边第二条是一个分子量从6.5 kDa到200 kDa的marker,为什么这东西经常跑出来的都像是降解了的样子...........

SDS-PAGE一个奇怪的现象,没找到过同类的......
20150109.png
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kewbe

捐助贵宾 (小有名气)

你的marker应该也需要95度热5分钟,不是即时可使用的marker
前沿的2条是不是一条蓝色一条黄色,染色前跑胶过程中可以看见的
2楼2015-08-01 03:47:12
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斌猫斌喵喵

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kewbe at 2015-08-01 03:47:12
你的marker应该也需要95度热5分钟,不是即时可使用的marker
前沿的2条是不是一条蓝色一条黄色,染色前跑胶过程中可以看见的

但是同样的上样缓冲液大部分时候是1条线,偶尔会出现两条线..............marker也预热过了,分子量较大的那个区域总是这样,换浓度高点的胶片跑出低分子量的条带倒还算清晰.....
3楼2015-08-01 11:42:44
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sheepshowzz

铜虫 (初入文坛)

襪, 這marker要怎麼比對分子量?
abcdogbitepig
4楼2015-08-03 10:36:50
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673643401

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1.可能是蛋白胶的原因,配胶不均匀或胶的浓度不适合,还有可能蛋白胶有漏洞。
2.Maker问题,换一种试试。
3.跑胶的电压是否太大,导致蛋白降解。
希望对你有帮助
5楼2015-08-03 12:37:27
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1510050322

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

是不是胶配制的问题啊?
6楼2015-08-03 19:42:12
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