应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒提取为什么浓度不高
192/2返回列表上一页12
查看: 4545  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

rodickholm

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该是低拷贝，可以收至少500ml菌，多次上柱离心，提高浓度

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
11楼2015-08-01 10:03:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

表弟爱网游

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

如果你的菌是低拷贝，可以尝试分5管提，最后加水溶解过滤膜上的质粒时，只第一管加水，把第一管离心下来的水加入到第二管，在加入到第三管，依次下去，浓度会很高。加水一定要加到膜上面溶解。我没用过你这种试剂盒，具体情况不太清楚。我以前用都是国产的柱子提的。低拷贝质粒就5到8管合成一管，浓度都足够了。
赞一下(1人) 回复此楼
当一切如飞舞的落叶坠落，惋惜之余，也要学会原谅与释怀
12楼2015-08-02 04:27:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dd812007135

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by fengjunchen at 2015-08-01 09:37:03
测了od600没？离心沉淀下来的的菌多不？怕是没摇起来……这浓度也太低了。

第一步我就特别注意，让它完全悬浮，
赞一下 回复此楼
13楼2015-08-02 09:26:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dd812007135

木虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by tupo44 at 2015-08-01 09:48:38
确定是高拷贝数质粒么，用的哪个菌克隆

不知道是不是高拷贝的，这个是老师设计的质粒，我们是用大肠杆菌培养克隆
赞一下 回复此楼
14楼2015-08-02 09:27:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

带壳的鸡蛋

金虫 (小有名气)
最后那步加的量减少，不按照建议的来。
赞一下(1人) 回复此楼
15楼2015-08-02 17:34:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linglingys

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

本人之前也是抽提浓度低，后来换种感受态就OK了
赞一下(2人) 回复此楼
16楼2015-08-02 20:08:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuwenmei

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

浓度只有60ng/ml??这个你是怎么检测的？？？
赞一下 回复此楼
下雨天就算没有伞，我也要学会努力奔跑！
17楼2015-08-03 10:52:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxfeffie

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
dd812007135: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-08-04 12:17:42
你们三个人都是这种情况的话，我建议换一换菌种吧。我之前提取高拷贝的T载体时也偶尔会很低，只有几十ng，重新转化新菌种在提取就好了。
赞一下(2人) 回复此楼
18楼2015-08-03 15:36:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ssswzf

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

群主你的质粒保存多久了？如果量特别低的话，是不是考虑一下重新转化宿主菌，然后再提质粒看看！另外，你用的柱子提取吧！
赞一下(1人) 回复此楼
19楼2015-08-24 13:37:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dd812007135 的主题更新
192/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 8/400 2026-11-05 13:44 by My20PsvIExYO
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-05 13:33 by My20PsvIExYO
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 kvewwGtKktqB 2026-11-04 6/300 2026-11-05 13:22 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 kvewwGtKktqB 2026-11-04 9/450 2026-11-05 13:22 by My20PsvIExYO
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 kvewwGtKktqB 2026-11-04 11/550 2026-11-05 13:13 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 9/450 2026-11-05 13:11 by My20PsvIExYO
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 9/450 2026-11-05 13:11 by My20PsvIExYO
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-05 13:11 by My20PsvIExYO
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 7/350 2026-11-05 13:00 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 8/400 2026-11-05 13:00 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 17/850 2026-11-05 12:51 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 6/300 2026-11-05 12:16 by My20PsvIExYO
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 7/350 2026-11-05 11:12 by PYZmcHr5kSaq
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-05 11:10 by PYZmcHr5kSaq
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 8/400 2026-11-05 10:59 by PYZmcHr5kSaq
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-05 10:48 by PYZmcHr5kSaq
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-05 10:48 by PYZmcHr5kSaq
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-05 10:39 by PYZmcHr5kSaq
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 9/450 2026-11-05 09:20 by PYZmcHr5kSaq
[基金申请] 各位基础老师们，看完中央《从严治党》的决定后，对学术界更加有信心了吧 +5 iaeyuan 2026-11-01 5/250 2026-11-04 14:43 by jinchengzi
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭