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zouyong677

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于cck8的对照组和溶剂问题已有3人参与

用CCK8做药物对肿瘤细胞的细胞毒作用检测,有对照组(培养液+cck8),0加药组(细胞+培养液+cck8),数个不同溶度的加药组(细胞+培养液+cck8+药物[包含溶剂的])。增值率计算=A加药-A对照/A0加药-A空白
问题1、作用的药物是粉末,需要有机溶剂溶解,可以被DMSO 甲醇溶解,选哪一个。
问题2、CCK8试验中,如何去除溶剂的影响,我想是在对照组和零加药组也加上相应量的溶剂,就能去除溶剂的影响,不知道是否可行?其实因为药物处理各组所加入的溶剂也不同,所以不也不清楚量如何加。你们是用什么方法来去除溶剂的影响。
问题3、吸光度的范围应该是在多少比较合适,我们这边认为2以下就可以,不知道大家认为?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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笨笨小萌新

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaomili1206 at 2015-08-25 14:05:39
1.可以选用DMSO ,以前我也做过类似的实验,少量的DMSO对细胞的影响几乎可以忽略,培养基中浓度为小于0.5%就可以了,但据我实验观察小于0.25%肯定没有问题。
2.去除溶剂的影响,在进行药物毒性实验时,设定药物浓度 ...

可是用DMSO 溶解药物,再用培养液稀释,就容易析出,请问你们遇到过这样的情况吗
5楼2021-11-22 11:43:53
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xiaomili1206

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1.可以选用DMSO ,以前我也做过类似的实验,少量的DMSO对细胞的影响几乎可以忽略,培养基中浓度为小于0.5%就可以了,但据我实验观察小于0.25%肯定没有问题。
2.去除溶剂的影响,在进行药物毒性实验时,设定药物浓度为0时,即为溶剂的作用,可以观察是不是对细胞有影响。先比较同一种药物不同浓度的影响,在比较不同药物相同浓度的影响。至于溶剂,一般少量对下包的影响都不大。
3.吸光度的范围可以根据设定的药物的浓度检测结果,肿瘤细胞我没有做过,我做的是正常人体细胞。
交流:http://www.engreen.cn/
2楼2015-08-25 14:05:39
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xiaozhe1018

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

您好,您做的培养液是含有血清的吗?加药处理的时候你们是怎么处理的?药物的浓度是用什么配的含有血清的培养基还是不含有血清的培养呢?
3楼2016-03-01 22:19:25
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yln2017

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问一下,我做淋巴细胞增殖实验,淋巴细胞是悬浮细胞,药物有氧化还原性,加入CCK-8之前需要更换新的培养基,实验室没有平板离心机,该怎么操作,特别困扰我,知道的同学麻烦告诉我一下,不胜感激。
4楼2017-02-18 18:35:00
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