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关于DGGE
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xiadongliang
金虫 (正式写手)
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7楼2009-05-06 20:43:49
pzhan1982
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xyklmu
至尊木虫 (知名作家)
虫眼看世界
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也不是很常规吧，呵呵。 DGGE做的变性梯度凝胶其使用的都是常规的做PAGE凝胶的那些，尿素用的是超纯的，以前都是用的加拿大的那个生工的，不是上海的那个，呵呵。 这种胶做起来还是蛮有意思的，开始的时候只加少量的水就可以的，否则尿素一旦溶解，胶的体积会超出去的，我以前也吃过这方面的亏。 跑DGGE胶的时候，温度恒定是必须的，由一个循环加热的泵才可以，记得也是进口的，上样的时候要先用注射用的针头冲洗一下胶孔，否则尿素析出，会将你的样品顶起来的。 要先做一个timecourse，看看多长时间你的样品聚焦，多长时间样品停止聚焦，直到跑出凝胶，一般每隔两个小时点一次样，最少得点7~8样的。 还是很怀念那时做DGGE胶的时候，想想已有10年了吧，^_^ 欢迎两位继续交流做DGGE的经验和教训。 |
4楼2008-08-11 20:59:14
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