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mahayana

铜虫 (小有名气)

[交流] 关于DGGE

请问虫友们实验室做DGGE的有关试剂都是向哪个公司买的,都有啥特殊要求没?谢谢!
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xiadongliang

金虫 (正式写手)

直接买bio的不就行了?就是相当的贵啊。
7楼2009-05-06 20:43:49
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pzhan1982

金虫 (著名写手)

在线等待,我也想知道
2楼2008-08-11 15:49:08
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lizlegend

新虫 (小有名气)

dgge还是很常规的一些做法吧,你只要买的东西不是很歪,应该都可以做出来哈,东西也不贵
3楼2008-08-11 15:55:17
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xyklmu

至尊木虫 (知名作家)

虫眼看世界

引用回帖:
dgge还是很常规的一些做法吧

也不是很常规吧,呵呵。
DGGE做的变性梯度凝胶其使用的都是常规的做PAGE凝胶的那些,尿素用的是超纯的,以前都是用的加拿大的那个生工的,不是上海的那个,呵呵。
这种胶做起来还是蛮有意思的,开始的时候只加少量的水就可以的,否则尿素一旦溶解,胶的体积会超出去的,我以前也吃过这方面的亏。
跑DGGE胶的时候,温度恒定是必须的,由一个循环加热的泵才可以,记得也是进口的,上样的时候要先用注射用的针头冲洗一下胶孔,否则尿素析出,会将你的样品顶起来的。
要先做一个timecourse,看看多长时间你的样品聚焦,多长时间样品停止聚焦,直到跑出凝胶,一般每隔两个小时点一次样,最少得点7~8样的。
还是很怀念那时做DGGE胶的时候,想想已有10年了吧,^_^
欢迎两位继续交流做DGGE的经验和教训。
位卑未敢忘忧国。
4楼2008-08-11 20:59:14
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