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lindashang

铜虫 (小有名气)

[求助] 急!!!求助:WB上用cst公司抗体pvdf膜上有黑色下雨般点条带状 已有1人参与

如附件,我的膜上出现下雨般的黑色点状物。一抗用5%BSA配置,1:1000,按照抗体说明书,二抗是兔抗1:5000稀释,抗体刚刚新买的,201411货期
同一张膜剪开上内参抗体1:2000,二抗羊抗1:2000稀释,同一张膜用5%脱脂牛奶封闭的,时间都是按照抗体说明书的,洗膜洗了3次每次10-15min,不知道怎么回事,样品很珍贵啊,求大神指点!!!
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  • 2015-07-24 09:12:28, 1.5 M
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  • 2015-07-24 09:12:32, 1.5 M
  • 附件 3 : vinculin_1.tif
  • 2015-07-24 09:12:40, 1.5 M

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百尺竿头,更进一步
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lindashang

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 854785345 at 2015-07-27 09:17:30
有没有可能是你的相关蛋白有问题?这个抗体你是第一次使用?以前有没有实验室的人用过?人家用的有没有出现这种情况?

同一张膜,内参比较好很奇怪,已经试了6次了
百尺竿头,更进一步
6楼2015-07-27 10:34:00
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lindashang

铜虫 (小有名气)

附件的图就是这个,这是同样的样品,有大神遇到这样的情况吗
急!!!求助:WB上用cst公司抗体pvdf膜上有黑色下雨般点条带状
图片1.png


急!!!求助:WB上用cst公司抗体pvdf膜上有黑色下雨般点条带状-1
图片2.png


急!!!求助:WB上用cst公司抗体pvdf膜上有黑色下雨般点条带状-2
图片3.png

百尺竿头,更进一步
2楼2015-07-24 09:26:29
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854785345

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有没有可能是你的相关蛋白有问题?这个抗体你是第一次使用?以前有没有实验室的人用过?人家用的有没有出现这种情况?
5楼2015-07-27 09:17:30
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