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尿液DNA保存液 已有1人参与
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| 有谁知道用于提取尿液里病原体DNA的尿液该怎么保存吗？其保存液的成分是什么呢？求指点，非常感谢。 |
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【答案】应助回帖
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请自行准备：无水乙醇、生理盐水、离心管。 取出析出液和洗涤液，按以下操作： a) 析出液：4.5mL加入25.5mL无水乙醇；9mL加入51mL无水乙醇。 b) 洗涤液：9mL加入21mL无水乙醇；18mL加入42mL无水乙醇。 c) 配制好的析出液及洗涤液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。 取尿液5mL(尿液的取用量在1-5mL范围内)置于离心管中，5000 rpm离心5分钟，小心弃上清，向离心管中加入2mL生理盐水，轻轻振荡混匀，5000 rpm离心5 min，弃1900μL上清，剩余100μL上清，振荡混匀。 加入200μL 裂解液和20μL 消化液，振荡混匀，56℃水浴10 分钟。 加入500μL析出液，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响DNA的提取与后续实验。 将吸附柱放入收集管内，将上述溶液转入吸附柱内，静置2 min，12,000 rpm 4℃离心1 min，弃收集管内废液。 将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液至吸附柱内，12,000 rpm 4℃离心1 min，弃收集管内废液。 将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 4℃离心2 min，离去残留的洗涤液。 取出吸附柱，放入新的1.5 mL 离心管内，加入30-60 μL 洗脱液，静置3 min，12,000 rpm 4℃ 离心2 min，收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。 |
2楼2019-03-13 09:24:57