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求高手帮忙，分析RNA抽提结果
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各位高手： 小弟是新手，最近抽酵母RNA,电泳结果总看不到28s 18s ，但是在溴芬兰前面可以看到很亮的带，A260/280=1.88，用他们做RT-PCR，也可以扩出来，但是不敢往下做，RNA是用来做差异杂交的，不知道什么原因，忘各位高手赐教，急！！！！ |
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2楼2008-08-07 21:25:23
haiven
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mark32280667806(金币+1,VIP+0):非常感谢，你的答复！！！
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你的样品跑得太久了，不好说是不是降解了，你其实可以看到在你的最亮的一团RNA的后面还是有28S和18S的rRNA的。以后跑RNA电泳需要电压低，时间短，最好有甲醛胶。 还有一个问题，你没有提到你的上样量是多少？我怀疑你是上样量太大了，以至于5S的小RNA结合了太多的EB，后面的28和18S的RNA的量其实是不少的，只是出现了EB的缺如，导致你认为降解或者看不到了，EB的涌动方向和RNA是相反的，你可以去EB缓冲液里面浸泡一下，看看是否会增加28和18S RNA的亮度。 我做体外转录的时候，经常会得到大量的转录物，以至于经常看不到转录物后面的模板了，其实模板还是很多的。 |
10楼2008-08-13 01:24:04