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byebyey

[交流] 有关蛋白表达的问题

我想请问一下在表达的蛋白的过程中,标签会不会与蛋白分开啊!为什么我纯化后的蛋白中没有标签的分子量?
    还有能给我介绍几个好的GST标签纯化蛋白柱子的厂家么?
    非常感谢!
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byebyey

非常感谢!但是我纯化完之后有电泳鉴定,也正确,三天之后再电泳目的带的分子量就不对了,而且很模糊了!现在奥运期间,什么都订不到!
3楼2008-08-07 14:43:26
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户

★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):欢迎常来,积极交流。
首先确定阅读框是否正确,确保会按照你预想的序列来表达并带上GST标签,然后尽量保证低温无菌操作吧,防止蛋白的降解。只能如此了,我曾经也出现过这种情况最后不了了之了,现在想来也说不清什么原因,就是大小不太对,有条件的话可以做westen或Elisa试试。柱料就用进口的吧,当初用的好像是GE的,具体收购的哪个牌子忘记了。
金币是赌出来的
2楼2008-08-07 11:40:45
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jasco

木虫 (正式写手)

★
xyklmu(金币+1,VIP+0):欢迎常来,提供信息,积极交流
GE收购的安玛西亚公司(Amersham)
4楼2008-08-07 17:18:39
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jasco

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by byebyey at 2008-8-7 14:43:
非常感谢!但是我纯化完之后有电泳鉴定,也正确,三天之后再电泳目的带的分子量就不对了,而且很模糊了!现在奥运期间,什么都订不到!

能上图来看看么?
5楼2008-08-07 17:19:10
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