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[求助]
大肠杆菌噬菌体培养 已有1人参与
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向各位前辈求助，本人在做噬菌体的研究，筛选纯化后平板验证得到噬菌斑接近1cm的噬菌体，SM液保存，转入液体扩大培养后遇到问题。 培养后液体浑浊，琼脂板检测没有噬菌斑，而且长未知杂菌及大肠杆菌。重复实验多次，都是这种结果，曾试过噬菌体SM液与大肠杆菌共同孵育1小时后接入LB培养；大肠杆菌培养5小时后接入噬菌体；大肠杆菌和噬菌体同事接入培养。结果都一样，都是液体浑浊，平皿验证发现长杂菌。 原因是什么？ 现在研究已卡住，无法继续进行，请前辈指点迷津！ |
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
jackie126126(silicare代发): 金币+5, 谢谢参与 2015-08-10 09:56:31
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jackie126126(silicare代发): 金币+5, 谢谢参与 2015-08-10 09:56:31
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我是做T4噬菌体相关实验的，长期对噬菌体相关实验进行研究。你说的这种情况可能是扩大培养过程中噬菌体量接入量过少（大肠杆菌菌体量过多）导致了无法扩大培养。因为在大肠杆菌中存在抵制噬菌体的机制（限制修复系统：RMS，以及目前研究最热门的CRISPIER系统），假如大肠杆菌量多而噬菌体个数过少时，噬菌体无法有效的对宿主进行侵染。能否更加详细的对你的实验过程进行说明，我好对你实验过程中存在的问题进行详细的解析~~ 或是直接给我发消息也可以~ |
2楼2015-07-21 00:29:41
3楼2016-03-20 12:37:29
4楼2019-01-16 10:23:10
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