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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 分类/鉴定 » 真菌18sdna的扩增 电泳图分析
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雪碧三块五

铁虫 (初入文坛)

[求助] 真菌18sdna的扩增 电泳图分析 已有2人参与

体系：buffer 2.5ul , mg2+ 2ul, dntp 0.5ul,dna 2ul,引物各0.5ul,taq0.2ul加水至25ul
94 5min。94 30s，53 30s，72 2min，循环30次。72 ，10min。
目标条带在400bp左右
求助这是什么情况

真菌18sdna的扩增  电泳图分析
7.17wan.jpg
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1楼 2015-07-19 14:27:24
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feng37ye

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
雪碧三块五: 金币+3, ★有帮助 2015-07-23 20:16:18
有杂带。体系中，酶加到0.3，片段短，72延伸1min就够了，久了易出杂带。先提高退火温度，还有杂带，则考虑降低模版量。还有，dntp的浓度很高吗？感觉量很少

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2015-07-19 23:30:31
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雪碧三块五

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by feng37ye at 2015-07-19 23:30:31
有杂带。体系中，酶加到0.3，片段短，72延伸1min就够了，久了易出杂带。先提高退火温度，还有杂带，则考虑降低模版量。还有，dntp的浓度很高吗？感觉量很少
...

dntp用的是10mM,感觉应该差不多了
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3楼2015-07-20 08:54:39
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古木天恕

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
雪碧三块五: 金币+2 2015-07-23 20:16:26
你这个是多大的marker啊，延伸时间有点久，我估计你提的DNA有问题，
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4楼2015-07-20 09:04:06
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