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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 求助细胞免疫荧光
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xinyicmjy

金虫 (小有名气)

[求助] 求助细胞免疫荧光 已有1人参与

如题，最近一直做细胞免疫荧光，结果不理想，双染，红色和核染效果较好，绿色怎么都做不出来较好的效果。如图，所有实验步骤完全按照一般的步骤做，抗体稀释浓度也作了改变，仍然没效果，隐隐约约。另一情况是始终只有核处有绿色，而文献中该蛋白在胞浆中表达。是荧光二抗问题还是该蛋白本来就没表达？还是其他问题？求助高手指点。。。

求助细胞免疫荧光
合.jpg


求助细胞免疫荧光-1
绿色.jpg


求助细胞免疫荧光-2
1.jpg


求助细胞免疫荧光-3
合.jpg
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1楼 2015-07-18 09:21:09
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xinyicmjy

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by muchong.X at 2015-07-18 18:58:53
楼主你好，首先根据你的结果你说用绿色染时蛋白表达在核里不太严谨吧，因为你此时并没有染核，你应该有个核染的图片，如果两图可以Merge那还能说明。第二幅图和第三幅图感觉像是拍照有点问题，你是不是设参数时绿色 ...

最后那张就是倒数第二张的merge,是蓝色是核染的，红色和绿色分别是两种蛋白
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3楼2015-07-19 20:13:20
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muchong.X

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主你好，首先根据你的结果你说用绿色染时蛋白表达在核里不太严谨吧，因为你此时并没有染核，你应该有个核染的图片，如果两图可以Merge那还能说明。第二幅图和第三幅图感觉像是拍照有点问题，你是不是设参数时绿色和核染的混用了？第二幅图感觉像是曝光时间有问题，你可以调一下曝光时间，你那个好像不是绿色，感觉像是黄色的。
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2楼2015-07-18 18:58:53
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