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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 求教硅胶柱粗分中遇到的一些基础问题，新手
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唐cc

新虫 (小有名气)

[交流] 求教硅胶柱粗分中遇到的一些基础问题，新手 已有7人参与

第一次过硅胶柱，很多不懂。样品是乙酸乙酯部分 试了石油醚乙酸乙酯各个梯度展开，点在薄层板上分的开。100:4时第一个点rf=0.2左右，5：1和3:1点可以分得开
1、乙酸乙酯样品黑浸膏状，110g,拌样硅胶用量是多少，是不是要看溶液黏度？
2、装柱硅胶的用量大概多少，选择多粗的柱子？
3、石油醚乙酸乙酯的梯度怎么设计？多大的跨越才合适？
4、每个梯度的洗脱体积一般多少？每个馏分接收体积一般多少？
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1楼 2015-07-15 08:16:04
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chenjiajiang198

至尊木虫 (著名写手)
★
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这个还真的是一言两语说不完的………………自己拿一点样品来做个小试就差不多了…………反正这个东西都是靠累计起来的，很多时候看再多别人写的哪些啥子经验之谈的言语都不如自己去过几根柱子的
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2楼2015-07-15 21:10:22
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czzlnkar

新虫 (著名写手)
★
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过柱子是个经验活，而且别人没做也没看到板子的情况光靠说也拿不准，有经验的人跑个2-3次板基本就摸清了配比，这玩意没点实际操作不积累经验根本不行，第一次我也摸了十来遍才调出来，加硅胶按书上说的比例有的时候不适用，拌样加多少硅胶，装柱装多高硅胶，用多粗的柱子装都得看经验，有那经验一看就知道加多少，有感觉了。110g的东西，拌上硅胶后，那柱子得不是一般的粗，至于多少溶剂，可以收集洗脱液之后点板看看
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3楼2015-07-15 21:45:35
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qydhn

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1、拌样硅胶大概用量是样品的1~2倍
2、装柱硅胶大概用量是已经拌好样的20倍
后面两个问题样品不同而不同，无法给你准确的答案
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4楼2015-07-15 21:47:10
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cqyc007

金虫 (小有名气)
★
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楼上说的有道理的，根据一般的经验参数，自己多试试几次看看分离的效果就有感觉了，你就成高手了
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5楼2015-07-18 09:05:54
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公仪冬儿

木虫 (小有名气)
★
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前两个问题自己看看书本就可以，拌样硅胶的量以你的样品散开不粘结为准。至于你的洗脱剂梯度和极性的话，第一个点100:4，分开5:1，跨度有点大。我觉得你可以25:1,10:1等点板，摸清你要的点在每个极性段的位置，然后边点板边改变极性。新手的话可以保守的过，极性变化小一点，但是工作量是比较大。每个梯度的洗脱体积要看你的柱体积是多少，还要看你化合物的量。总之，柱子过多了就会有经验的，加油。
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6楼2015-09-30 18:26:19
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HyunMario

木虫 (职业作家)
★
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这个量的我上过两次硅胶柱，100-110g硅胶拌样（100-200目），上直径8cm的柱子，装柱硅胶（200-300）目称取270g 。应该可以从50:1开始冲，我一般50:1-30:1-20:1-10:1-1:1-0:1。一般我是一个梯度冲2L（这个上样量），当然最好根据点板情况，一般300-500ml接一次
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7楼2015-10-02 13:57:53
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海洋之斌_520

铁虫 (小有名气)
★
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建议 先上制备液相看下总体情况，再点板看下情况（20%，50%，80%），一般而言，一开始一般都是用石油醚先除油，小极性是20%，30%，40%，50%，70%，80%，100%，大极性是20%，50%，60%，70%，80%，100%的过，减压柱过挺快的，三天就过完了。拌样的话，我一般都是选300-400目的，大概2倍的，一开始按1.5倍算，再看下还有多少没有拌好的，再来加硅胶。一般硅胶都是慢慢加，应用尽可能少的硅胶拌样
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好好做实验
8楼2015-10-10 12:06:47
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