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abc117

木虫 (初入文坛)

[交流] 求助 5-race条带弥散

最近在做5—race,用的是末端加A的方法,没有用试剂盒,做了巢式以后,条带都很弥散,想请教下大家,看有什么好的解决方法没?引物根据PP5设计,都很特异,提的RNA也挺好的,反转录用的是特异引物,有什么好的方法验证cDNA没有啊?你们的cDNA一般是如何纯化的?谢谢大家了
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superarm

金虫 (正式写手)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
我一般都用C加尾,用巢式PCR,第一轮dG-AP和特异性引物,第二轮AP和特异性,CDNA用TKARA的PCR产物纯化试剂盒。
与分子生物学的同仁一起遨游科学的海洋!
2楼2008-08-05 16:50:33
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abc117

木虫 (初入文坛)

谢谢哈,我再做做看
3楼2008-08-07 10:26:05
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abc117

木虫 (初入文坛)

大家还有什么好的建议?焦急等待中哈
4楼2008-08-11 11:36:31
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