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做蛋白的抑真菌实验，用96孔板做IC50，一直做不出来
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最近在做蛋白的抑真菌实验，用96孔板做IC50，一直做不出来。有几个问题想请教大家？ 1、做孢子悬浮液，我是将在平板上的真菌用接种针接到PDB培养基中，然后放在摇床中摇4-6天，再用8层纱布过滤，用水稀释过滤后的孢子到所需的浓度。不知道这样做孢子悬浮液对不对？之前实验室没人做过。 2、用纸片扩散法做抑菌圈，效果还可以，但是IC50就是做不出来，只有一次做出想要的结果，之后就没重复出来，加药后孔吸光值没减反倒增了，不知道怎么回事？ 3、用纸片扩散法做抑菌圈，在纸片的周围时常会出现一圈白色的圈，网上说那是蛋白渗透圈，由于样品浓度太高了。可是我那浓度还不够呢，还没达到文献的要求呢。这个圈怎么能消除啊? 求高手指点！！！！ |
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