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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 厌氧菌的分离、培养操作是怎么样的？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

[求助] 厌氧菌的分离、培养操作是怎么样的？ 已有3人参与

实验室现在有厌氧手套箱和密封培养罐（三菱的，密封箱加除氧剂）
想要利用这些设备分离特定的厌氧菌株，有些问题存在疑问。
1、手套箱紫外照一会不能完全无菌，又不像超净台能鼓无菌风，又不能用酒精灯，如何保证操作不会染杂菌？
2、手套箱中不能点酒精灯，划线时如何对接种针灭菌？
3、培养基如何完全除菌？（之前试做了几回，没有除氧，就像常规培养基那样配制灭菌，然后放到手套箱中过夜）
另外，请大家推荐一些厌氧菌分离培养的实验教材和标准操作说明的，谢谢！
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1楼 2015-07-14 11:00:21
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RuyangHan

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小毛孩24: 金币+20, ★★★很有帮助, 非常感谢！ 2015-07-14 13:45:41
假如你用密封罐，可能只适用于兼性厌氧菌。严格厌氧操作你可以用亨盖特厌氧试管或厌氧血清瓶，培养基配制是用通氮气除氧，用橡胶盖密封。然后可在厌氧手套箱里接种。
问题1. 可以迅速转接，染菌概率就小多了，没问题的。
问题2. 用灭过菌的牙签或塑料枪头就可以
问题3. 你可以用亨盖特厌氧试管或厌氧血清瓶，培养基配制是用通氮气除氧，用橡胶盖密封，加铝盖封口灭菌。
详见网站：http://www.ruyangmicrobio.org/anaerobic-cultivation/
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2楼2015-07-14 12:40:44
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暴走的小鹏
3楼2015-07-15 14:13:36
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小毛孩24: 金币+6, ★有帮助, 谢谢！ 2015-07-16 10:20:18
灭菌可以这样，
不操作的时候，打开密封操作台，通入空气，当然你外环境最好是P1甚至P2环境。这个时候可以同步照紫外，目的是把厌氧菌杀灭，有氧环境下，厌氧菌会很快死亡。然后用酒精擦台面，紫外灭菌完再关闭操作台，通氮气，这样相当于把空气中的有氧菌窒息处理。通常通完N2后保存一段时间再照1-2小时紫外，可以把兼性厌氧菌除去。。当然了，操作的时候也要避免交叉污染，台面内分清洁净区和污染区。
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4楼2015-07-16 10:12:23
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jadeyu1888

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也在分离厌氧菌，关于问题2，我是买了一台红外灭菌器，内心温度有800度，可以对接种环进行灭菌。另外也有一些一次性的接种环和接种针，已经灭过菌的，但是放进去的时候外包装有可能带的细菌会污染到。我觉得楼上用灭菌牙签或枪头的建议很好，下次我也试试。我一灭菌，丁基胶塞就会冲开，我用的是50ML顶空瓶，不知道哪里有配套的瓶盖。
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5楼2016-09-01 14:40:37
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