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格桑花海

金虫 (小有名气)

[求助] 请教哪家公司做LC-MS比较好 已有3人参与

最近在纯化一个融合蛋白,蛋白分子量大约66KDa该蛋白在N末端添加了一个乙酰基,需要验证乙酰基是否成功加上去了,所以想做个质谱鉴定,但网上查资料说分子量太大单纯做质谱不能很好地分辨,所以想做个液质联用,请大家推荐哪家公司做这方面比较专业。
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李海滨
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supercat0821

至尊木虫 (职业作家)

大分子蛋白质在用软电离方式会出现一簇峰,带有不同电荷的峰。虽然蛋白质分子量大,但是质谱图里显示的是m/z,所以一般也是可以得到你想要的图谱的。而且那一簇峰很好识别,可以做个ESI-Q-TOF试试看,并且结合被测物自身的性质。

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5楼2015-07-14 09:23:46
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木子鸟依依

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
格桑花海: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-07-20 17:28:07
清华大学分析中心
上帝偏爱奔跑者!
10楼2015-07-16 09:19:49
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james-james

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与,应助指数 +1
格桑花海: 金币+100, ★★★★★最佳答案 2015-07-13 23:23:31
找北京颖泰,他们是GLP实验室,LC-MS很专业

祝心想事成

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2楼2015-07-13 22:32:18
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james-james

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

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格桑花海: 金币+50, ★★★很有帮助 2015-07-14 10:30:17
格桑花海: 金币+50, ★★★很有帮助 2015-07-14 10:30:31
引用回帖:
3楼: Originally posted by 格桑花海 at 2015-07-13 23:23:09
请问是北京中农颖泰还是北京颖泰嘉和呢?
...

是北京颖泰嘉和,好好和他们商量,一般做样品比较贵,只出图,不出报告2000元一个样品,出报告可能过万

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4楼2015-07-14 00:07:47
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supercat0821

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 格桑花海 at 2015-07-14 10:41:18
我以前也没接触过这方面,刚刚接触科研,我看文献做过质谱的显示测出的结果和理论值分子量有几十左右的差距,所以我们这个单独做质谱如果结果分子量也和理论值相差几十(乙酰基分子量才42),那样就不能确定到底是 ...

根据正负离子模式的不同,是有可能在原来分子量基础上加一定值的(比如加钠、加钾)。如果结合乙酰基后的分子还算稳定,那么你所得到的分子簇的分子量都会基本一致的。而且加42的峰会很少,与你想要的结果重合的机会不是太大。你先试试看

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8楼2015-07-15 14:59:13
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irvine2015

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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格桑花海: 金币+90, ★★★很有帮助 2015-08-26 11:20:41
引用回帖:
7楼: Originally posted by 格桑花海 at 2015-07-14 10:41:18
我以前也没接触过这方面,刚刚接触科研,我看文献做过质谱的显示测出的结果和理论值分子量有几十左右的差距,所以我们这个单独做质谱如果结果分子量也和理论值相差几十(乙酰基分子量才42),那样就不能确定到底是 ...

如果ESI-Q-TOF具有lockmass离子源,精度(分辨率高的)非常好,通常为10ppm。反褶积后,ESI-Q-TOF应该给你化合物的高精分子量。你应该最好同时测试添加了一个乙酰基的蛋白和没添加一个乙酰基的蛋白,那样就能确定到底是乙酰基导致的还是质谱本身造成的。
广州是我的风水宝地!
11楼2015-07-17 23:18:19
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格桑花海

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by james-james at 2015-07-13 22:32:18
找北京颖泰,他们是GLP实验室,LC-MS很专业

祝心想事成

请问是北京中农颖泰还是北京颖泰嘉和呢?

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李海滨
3楼2015-07-13 23:23:09
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格桑花海

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by james-james at 2015-07-14 00:07:47
是北京颖泰嘉和,好好和他们商量,一般做样品比较贵,只出图,不出报告2000元一个样品,出报告可能过万
...

恩,好的谢谢了!
李海滨
6楼2015-07-14 10:34:42
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格桑花海

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by supercat0821 at 2015-07-14 09:23:46
大分子蛋白质在用软电离方式会出现一簇峰,带有不同电荷的峰。虽然蛋白质分子量大,但是质谱图里显示的是m/z,所以一般也是可以得到你想要的图谱的。而且那一簇峰很好识别,可以做个ESI-Q-TOF试试看,并且结合被测物 ...

我以前也没接触过这方面,刚刚接触科研,我看文献做过质谱的显示测出的结果和理论值分子量有几十左右的差距,所以我们这个单独做质谱如果结果分子量也和理论值相差几十(乙酰基分子量才42),那样就不能确定到底是乙酰基导致的还是质谱本身造成的。查资料说做液质联用也就是做个肽谱可以检测出,所以不太清楚用哪种方法或者质谱(分辨率高的)可以检测出乙酰基是否正确修饰上去了。你说的ESI-Q-TOF我查查看!
李海滨
7楼2015-07-14 10:41:18
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格桑花海

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by supercat0821 at 2015-07-15 14:59:13
根据正负离子模式的不同,是有可能在原来分子量基础上加一定值的(比如加钠、加钾)。如果结合乙酰基后的分子还算稳定,那么你所得到的分子簇的分子量都会基本一致的。而且加42的峰会很少,与你想要的结果重合的机 ...

非常感谢!非常感谢!
李海滨
9楼2015-07-15 20:41:39
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