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jiajuqing

铜虫 (小有名气)

[交流] 跑PAGE胶玻璃板上弄上了石蜡油,怎么除掉,请大家帮忙解决!

今天比较郁闷,做PCR时加了石蜡油(mineral oil),结果跑非变性PAGE胶后的玻璃板上粘上了油,怎么也没弄干净。我原先以为没什么影响,结果在灌胶时,胶中满是气泡,又拆掉试了几次,灌出的胶里还是有气泡,有谁遇到过这种问题,最后是怎么清理干净玻璃板上的石蜡油了呀 ?
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migrentsparrow


lixiaoyi1981(金币+1,VIP+0):鼓励一下,常来转转
我没弄上过石蜡油
不知你是怎么处理板子?
我的经验是,不管洗得多干净,灌胶时都可能出现气泡,但是仔细洗干净以后用硅烷处理板子,之后再灌胶,就容易多了
2楼2008-08-04 23:37:59
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北国佳人

铜虫 (小有名气)

硅烷处理板子


reasonspare(金币+1,VIP+0):thx
硅烷处理玻璃板.很管用的
努力的小蜜蜂
3楼2008-08-05 08:19:11
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xyklmu

至尊木虫 (知名作家)

虫眼看世界

★ ★ ★
reasonspare(金币+3,VIP+0):thx
没错,以前我们自己跑测序胶的时候,必须的一步就是硅烷化板子,倒胶会容易地多。
楼主可以加加热,然后用有机溶剂去除石蜡油,彻底清洗,可以试试硅烷处理,一般的胶只要不是很大的,不必硅烷处理,只要板子干净就可以的。
位卑未敢忘忧国。
4楼2008-08-05 08:23:38
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jiajuqing

铜虫 (小有名气)

谢谢各位拉,我玻璃板上的石蜡油是做PCR时加在PCR管中的油,估计是跑胶点样时让枪头带到电泳液里了,最后拆板子下胶的时候粘到玻璃板上了。


我不清楚大家说的“硅烷处理”是怎么个操作,我也做过用亲和硅烷 和粘合硅烷制的胶,那样胶就是粘在玻璃板上的,染色的时候连同玻璃板一起染色。不知道大家说的“硅烷处理”是不是就是指这个?
5楼2008-08-05 16:38:04
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jiajuqing

铜虫 (小有名气)

再补充问大家一个问题,就是如果PCR完后想跑变性或非变性的PAGE胶,那做PCR时加不加石蜡油(mineral oil)呀。如果加的话,那点样是油对跑出的带和玻璃板有么有影响?
我跑琼脂糖时,PCR都是加油的,因为我觉得加了油的跑出的产物质量就是好,有人也谈说,加油的PCR效率是没加的5倍。
6楼2008-08-05 16:44:28
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xyklmu

至尊木虫 (知名作家)

虫眼看世界

回答5楼的问题:
我所说的硅烷处理,是指在做胶之前,用硅烷处理洗净的玻璃板,在制胶的过程中会很顺畅,不会出现气泡,做胶均匀,尤其是做梯度凝胶的时候,或者比较长的胶的时候,很方便的。但是硅胶处理的时候需要在通风橱内操作的。
硅烷处理的胶,我感觉是比较容易和玻璃板分离的,在做测序胶的时候常用,现在很少用到了,呵呵
位卑未敢忘忧国。
7楼2008-08-06 15:12:45
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