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向阳坊

铜虫 (正式写手)

[交流] PAGE胶凝得太快了,为什么呀?

今天在做双向中的SDS-PAGE时,发现凝胶过快。
第一次还没有灌胶,就在烧杯中发现有凝胶的丝状物;
第二次,灌胶时,玻板温度比手温略高,但由于药品全部加好,就继续灌胶,结果,压胶还没有压好,就好像已经开始凝胶了,而且这样,胶也压不平;
第三次,怀疑是自己的丙烯酰胺有问题,就用biorad的丙烯酰胺储液,结果,灌好胶,才压好一块板,另一块板的胶就好像开始凝了,用水压胶时,中间的一块小凸,怎么都压不下,凝了!
今天操作温度,差不多28℃、29℃,所有操作都和平常一样。原来在用水压胶后,开始有条分界线,后来分界线就会消失,等胶凝后才出现,都是正常的。
只是用的丙烯酰胺储液是前天配好后,没有放入冰箱,而一直在室温中放置,不知这个是否有影响?但是我第三次做时,换成买的单体储液了,可还是凝得这么快,为什么呀?
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puma2003

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
你加的ap或temed多了呗
2楼2008-08-03 15:45:50
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connexin

金虫 (小有名气)

★
reasonspare(金币+1,VIP+0):thx
可能温度太高了,你把胶的配置过程都放在冰上操作试试。
3楼2008-08-03 16:34:43
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wangyh2028

铁虫 (小有名气)

★
reasonspare(金币+1,VIP+0):thx
可能是temed或ap加多了,适当减少temed的量试试
4楼2008-08-03 16:54:20
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轻5飞扬

金虫 (正式写手)

★
reasonspare(金币+1,VIP+0):thx
出配方才知道问题在哪,不过楼上的讲的应该是主要问题
5楼2008-08-03 18:26:52
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maria229

木虫 (著名写手)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
减少过硫酸铵和TEMED用量看看,应该是加多了的缘故
6楼2008-08-03 22:05:48
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hihoney

铁杆木虫 (职业作家)


★
reasonspare(金币+1,VIP+0):虫友很幽默,但是不要让他人误会
lz那里的温度太高了,是气温的原因,所有的试剂(包括玻璃板都要预冷)

另外,天热了,你也要保护好自己,不要中暑。
7楼2008-08-04 12:57:34
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migrentsparrow

★
reasonspare(金币+1,VIP+0):积极交流奖
怀疑主要是ap的问题,加多了?
8楼2008-08-04 23:32:42
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fengyan

木虫 (小有名气)

★
reasonspare(金币+1,VIP+0):thx
过硫酸铵和TEMED的用量调整一下试试,祝楼主早日成功!
9楼2008-08-05 09:45:48
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zwlcxx

银虫 (小有名气)

★
reasonspare(金币+1,VIP+0):thx
过硫酸铵加太多了,温度对PAGE凝固起作用,但是不会这么大。
10楼2008-08-05 09:52:48
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