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旭写孟境

新虫 (初入文坛)

[求助] 乳酸菌耐人工胃液能力 已有3人参与

查到的乳酸菌耐人工胃液能力的具体操作方法是:将菌株接种于5mL MRS 液体培养基中 37℃培养24h,3000rpm 离心10min,弃去上清后将菌泥悬浮于5mL无菌生理盐水中。取1mL 菌悬液加入9mL人工胃液(盐酸、胃蛋白酶)中,混匀后置于37℃培养0h及3h。之后将培养液用无菌生理盐水进行梯度稀释,选择合适梯度的稀释液 1mL加入无菌空平皿,用 MRS 琼脂培养基倾注平板,于 37℃培养48h 后进行计数,计算存活率。
存活率(%)=3h活菌数/0h活菌数×100%
想问一下,在接菌之前人工胃液是否需要灭菌?
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wangbotao

银虫 (小有名气)

胃蛋白酶过膜除菌,其他的可以湿热杀菌,再混合,不过人工胃液ph较低,杂菌不易生长。乳酸菌计数用的是选择性培养基,故杂菌影响不大,可以做个空白对照

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走自己的路,让别人说去吧
6楼2015-08-28 00:42:06
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lovibond

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫美食家

优秀区长优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
旭写孟境: 金币+1, ★★★很有帮助 2015-07-08 15:48:26
个人理解,人工胃液需要无菌,但是不知道灭菌过程对实验的影响。
楼主可以对人工胃液进行微生物测试,如果无菌,不用灭菌,如果有菌,选用合适的灭菌方法吧。
外行,只是个人观点。

[ 发自小木虫客户端 ]
充实的活着!
2楼2015-07-07 19:44:09
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是水货

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
旭写孟境: 金币+1, ★★★很有帮助 2015-07-08 15:48:35
需要灭菌。众所周知我们自己配置溶剂的试管几乎度没有灭菌过,为了试验精度,建议灭菌。这样结果也更好分析些。
3楼2015-07-08 11:44:13
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yaliaihg

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
旭写孟境: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-07-08 15:48:03
sytucom: 金币+2, 回帖精彩,谢谢参与 2015-08-25 22:59:04
我做胃液耐受性实验时,是配了生理盐水灭菌,然后按比例向灭菌生理盐水里加的胃蛋白酶。胃蛋白酶没有经过灭菌~在超净台里操作的,计数结果没有发现有污染
4楼2015-07-08 11:49:52
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