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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 甘油保藏
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小蚂蚁521

新虫 (小有名气)

[求助] 甘油保藏 已有10人参与

请问用甘油保藏菌种，甘油该配制成什么样的浓度呢？保藏时和菌种按什么比例进行保藏呢？求师兄师姐不吝赐教！万分感谢！
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1楼 2015-07-05 09:23:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励新虫 2015-07-05 20:52:29
15-20%是用来保存细胞和组织的。细菌保存用的是70%甘油。不一样的。

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4楼2015-07-05 11:34:11
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499649610

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励应助 2015-07-05 20:52:38
50%的甘油，保藏菌种的时候按终浓度为15%保存，即300微升50%甘油和700微升菌液
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5楼2015-07-05 13:39:36
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普通回帖

wadecao

禁虫 (正式写手)
★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励应助 2015-07-05 20:50:42
本帖内容被屏蔽
2楼2015-07-05 09:56:57
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yigeerliu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们这边的甘油浓度一般是15~25%都可以
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3楼2015-07-05 10:47:14
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my-牧颜

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励应助 2015-07-05 20:52:44
甘油浓度30%，用无菌水配制，121℃灭菌30min。保藏量为甘油体积的30-50%，保藏后及时置于-80℃冰箱即可。
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6楼2015-07-05 15:24:27
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malou815

禁虫 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励应助 2015-07-05 20:52:49
本帖内容被屏蔽
7楼2015-07-05 15:31:49
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
zhang8826857: 金币+1, 鼓励应助 2015-07-05 20:52:56
甘油保存的机制其实是跟对象含水量有关的。一般都细胞含水量很高，如果用高浓度甘油保存，甘油溶液会大量吸收细胞内水分，导致细胞脱水。同样，细菌本体含水量是很低的，脂类物质和蛋白含量很高，如果用低浓度甘油保存，由于低温环境下冰晶容易损伤膜结构，甘油溶液大量水分会由于渗透压的原因涌进细菌细胞壁内，导致质壁分离。所以保存浓度跟对象有直接关联，慎用

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8楼2015-07-05 16:45:46
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小蚂蚁521

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by my-牧颜 at 2015-07-05 15:24:27
甘油浓度30%，用无菌水配制，121℃灭菌30min。保藏量为甘油体积的30-50%，保藏后及时置于-80℃冰箱即可。

是用来保藏米曲霉的,浓度和比例有区别吗？

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9楼2015-07-06 09:08:12
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my-牧颜

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 小蚂蚁521 at 2015-07-06 09:08:12
是用来保藏米曲霉的,浓度和比例有区别吗？
...

我们是用来保藏细菌和放线菌的，甘油的主要作用是防止细胞冻裂死亡，我觉得这个方法也适用于真菌。
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10楼2015-07-06 13:53:29
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