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Apeterson

金虫 (小有名气)

[求助] HRP底物显色实验一定要经过生物素-链和亲霉素的放大系统吗?已有2人参与

看了好多,发现,如果使用HRP这种底物显色的免疫组化,大家都是使用了生物素-链和亲霉素的放大系统,我不太懂这里面的这个放大的作用。从理论上来讲,如果我直接使用HRP标记的二抗去与目的蛋白的一抗结合,然后用DAB去显色,这种方法存在什么弊端呢?希望有懂得人能教一教我,不胜感激。
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考研奋斗中····
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huajiahu

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

生物素-链和亲霉素灵敏度高,特异性强,HRP标记的二抗接一抗,会出现交叉,特别是用在双抗夹心法上。
2楼2015-11-06 17:05:06
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科研搬砖民工

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

一分子链霉亲和素可以结四分子生物素,可以通过这个来放大信号,提高灵敏度,而且特异性还很强,结合牢固
3楼2015-11-09 17:10:35
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