| 查看: 982 | 回复: 1 | ||
神经嘻嘻铁虫 (初入文坛)
|
[求助]
一些做transwell肝癌细胞（7703)侵袭的问题！求大神指点。
|
|
最近正学着做Transwell，用的24孔板是Corning的Transwell小室，基质胶是BD的Matrigel胶（说明书说是9.8mg/ml的浓度）。我主要做肝癌细胞的侵袭实验，小室铺7703肝癌细胞，下面24孔板里铺细胞A，研究肝癌细胞在A的影响下细胞侵润率。 我上室的细胞浓度为1*10^5，每孔100微升，用无血清的1640配。下室细胞也是1*10^5，每孔500微升，用10%FBS+DMEM配。Matrigel胶我不确定用多少稀释，就试了一下1:3和1:9，每孔100微升，培养24h，用棉签去除基质胶和上层培养基，PBS洗，10%福尔马林固定20min，PBS洗，0.1%结晶紫染色20min，DDW洗3次，棉棒擦干。 问题： 我之前看文献说肝癌细胞能贴壁在transwell底部，但是染色后显微镜下我一个细胞都没有看到？？难道是基质胶的稀释度不对么？？？下层细胞我倒是看到死了很多，但是A和7703长得一样，所有我不能确定它是否侵袭下去了。 请大神们帮我看看，到底哪一步骤出了问题！！！ 小女子跪谢啊！！！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
Bioresource Technology期刊，第一次返修的时候被退回好几次了
已经有6人回复
-
2025冷门绝学什么时候出结果
已经有4人回复
-
真诚求助：手里的省社科项目结项要求主持人一篇中文核心，有什么渠道能发核心吗
已经有8人回复
-
寻求一种能扛住强氧化性腐蚀性的容器密封件
已经有5人回复
-
论文投稿，期刊推荐
已经有6人回复
-
请问哪里可以有青B申请的本子可以借鉴一下。
已经有4人回复
-
孩子确诊有中度注意力缺陷
已经有14人回复
-
请问下大家为什么这个铃木偶联几乎不反应呢
已经有5人回复
-
请问有评职称，把科研教学业绩算分排序的高校吗
已经有5人回复
-
天津工业大学郑柳春团队欢迎化学化工、高分子化学或有机合成方向的博士生和硕士生加入
已经有4人回复
2楼2015-08-10 09:44:35