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20054184

银虫 (小有名气)

[交流] [求助]有关双脱氧法的问题

有关双脱氧法的问题
1. 双脱氧法中同位素标记的到底是dNTP还是ddNTP?我觉得是后者,可是王镜岩书上说是标记在dNTP上。(下册P601)
2. 书上还说,“目前,都应用35S标记的dNTP来代替32P-dNTP”,可是dNTP中哪有S啊?
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duanyongzhong

银虫 (正式写手)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
希望以下能够解决你的困惑!

是把dNTP中的a磷酸的O原子用35S取代作标记的,可以有S原子存在的。
在每一个测序反应中,加入一种含有标记的dNTP , 通过凝胶电泳可以把差别一个核苷酸的序列分开,然后放射自显影的方法读出碱基的序列,如果标记ddNTP 那将都出现在末端,这样就没有发挥标记的真正目的.所以说王镜岩书上这两点都是没有问题的.
2楼2008-08-16 11:49:10
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香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)

我觉得是标记ddNTP
duanyongzhong  朋友,您能否详细讲解一下呢???
漫洒英雄泪,相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行?一任俺芒鞋破钵随缘化!
3楼2008-09-05 11:47:32
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