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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » genotyping protocols求助！
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东方朔

至尊木虫 (知名作家)

[交流] genotyping protocols求助！ 已有1人参与

本人 菜鸟，新拿到一种条件性敲除小鼠，对方提供了 loxp 的杂合子小鼠和CRE小鼠。我们拿到之后，计划先把杂合子loxp小鼠合笼，得到纯合子Loxp的小鼠，再用CRE小鼠与其合笼，得到F1代小鼠，然后再把F1代小鼠合笼，得到目的基因条件敲出的小鼠。
那么问题来了：
1、请问原来鉴定loxp小鼠的引物是否可用于鉴定F1代和F2代小鼠？
2、我们的合笼策略正确否。

希望高手相助。谢谢！
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1楼 2015-06-09 21:09:58
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东方朔

至尊木虫 (知名作家)
继续求助！
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2楼2015-06-10 08:50:42
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东方朔

至尊木虫 (知名作家)
继续求助！
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金樽清酒斗十千，玉盘珍馐直万钱。停杯投箸不能食，拔剑四顾心茫然。
3楼2015-06-11 10:37:08
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lubuddy

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1、请问原来鉴定loxp小鼠的引物是否可用于鉴定F1代和F2代小鼠？
我觉得可以用来鉴定F1和F2代小鼠；

2、我们的合笼策略正确否。
你们的F1代老鼠和Cre老鼠合笼后无法得到纯和敲除吧。基因型应该是Cre/Floxp/+，一般来说我们都是Cre/Floxp/+这种杂合敲除老鼠之间配种，也有纯和敲除Cre/Floxp/Floxp和杂合敲除Cre/Floxp/+配种的，或者纯和敲除Cre/Floxp/Floxp和Floxp/Floxp配种的；取决于你们敲除的基因带来的表型和需要的敲除老鼠占出生老鼠的比例。
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4楼2015-06-14 00:49:10
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