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MR_zang

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白纯化 已有3人参与

今天用超滤管纯化咪唑洗脱下来的蛋白,分子量在45KDa,超滤管用的是3KDa的,转速4000r/min,10min,为什么离心到管底的液体那么少呢?跑过SDS,蛋白浓度较低。是不是需要经过很多次离心才能浓缩到1mL呢?
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答非所问

荣誉版主 (职业作家)

ET.....

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
答非所问: 回帖置顶 2015-06-09 18:25:21
MR_zang(99503102代发): 金币+2, 感谢应助,继续加油哈! 2015-09-05 16:32:48
要不停的用缓冲液冲洗,建议冲洗5-6次
获取网盘密码请点击:http://emuch.net/bbs/box.php(复制之后,黏贴到浏览器地址栏)
2楼2015-06-09 18:25:17
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普通回帖

MR_zang

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 答非所问 at 2015-06-09 18:25:17
要不停的用缓冲液冲洗,建议冲洗5-6次

是不是离心完成之后,每次只能离心出少量的buffer
3楼2015-06-09 18:34:44
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答非所问

荣誉版主 (职业作家)

ET.....

优秀版主

引用回帖:
3楼: Originally posted by MR_zang at 2015-06-09 18:34:44
是不是离心完成之后,每次只能离心出少量的buffer...

是的
获取网盘密码请点击:http://emuch.net/bbs/box.php(复制之后,黏贴到浏览器地址栏)
4楼2015-06-09 18:39:03
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winterb

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
MR_zang(99503102代发): 金币+2, 感谢您的应助,请继续为其他虫友解答疑惑噢! 2015-09-05 16:33:09
离心时间太短,转速过低.应该使用30分钟7500rpm.离心时间1到4次,再试一试.超滤管应该使用10KDa的.
5楼2015-06-10 07:07:16
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MR_zang

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by winterb at 2015-06-10 07:07:16
离心时间太短,转速过低.应该使用30分钟7500rpm.离心时间1到4次,再试一试.超滤管应该使用10KDa的.

转速过高,不会对膜有损坏吗?
6楼2015-06-10 08:30:00
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是水货

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


MR_zang(sytucom代发): 金币+1, 感谢应助,希望继续关注楼主回复,谢谢 2015-10-22 23:01:43
每次离心后要反复冲洗几次,得率确实是少
7楼2015-06-12 18:28:22
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halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥?

你好,请问你的浓缩管子是在哪里买的?我也想做蛋白浓缩,但是管子买不到啊,十分感谢!
现在我们能做的就是努力努力再努力
8楼2015-10-19 09:34:17
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