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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 求助：万古霉素的HPLC检测
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wy8611meng

木虫 (正式写手)

[交流] 求助：万古霉素的HPLC检测

求助：万古霉素的HPLC检测

HPLC检测的万古霉素的峰款很大，该如何解决？
    最近在建立万古霉素的HPLC的检测方法，文献上的流动相试了很多，也加过三乙胺和醋酸铵，pH也调了，但万古霉素的峰宽一直很大，一般在1.5min--2.1min，峰型倒还可以，对称，几乎不拖尾。
     万古霉素是 糖肽类抗生素，含多羟基，分子量1400多。对于分析这种大分子多羟基的化合物，大家有没有高招啊？
     注：使用的是国产的C18柱，流动相多用KH2PO4溶液和乙腈，PH在3左右
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1楼 2008-07-24 00:01:32
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song7323

金虫 (正式写手)
你把乙腈的比例再调大点 ，然后加一点冰醋酸试一试
或者把缓冲液换一下
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2楼2008-07-24 00:36:58
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song7323

金虫 (正式写手)
流动相为甲醇-乙腈-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(8:1:91,pH 3.2),流速1.0 mL·min-1,柱温35℃
你也可以试一试这个检测方法
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3楼2008-07-24 00:39:56
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wy8611meng

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by song7323 at 2008-7-24 00:39:
流动相为甲醇-乙腈-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(8:1:91,pH 3.2),流速1.0 mL·min-1,柱温35℃
你也可以试一试这个检测方法

最初试过这个，不出峰，很奇怪的~
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4楼2008-07-24 01:24:47
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song7323

金虫 (正式写手)
你把甲醇和乙腈的比例在调大点 改成（16：4：80，PH=3）再这基础上调换比例
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5楼2008-07-24 08:52:53
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evalu

铁虫 (小有名气)
★ ★
wingcat(金币+2,VIP+0):谢谢
Triethylamine buffer— Mix 4 mL of triethylamine and 2000 mL of water, and adjust with phosphoric acid to a pH of 3.2.

Solution A— Prepare a mixture of Triethylamine buffer, acetonitrile, and tetrahydrofuran (92:7:1), and degas briefly.

Solution B— Prepare a suitable mixture of Triethylamine buffer, acetonitrile, and tetrahydrofuran (70:29:1), and degas briefly.

The liquid chromatograph is equipped with a 280-nm detector and a 4.6-mm × 25-cm ODS column . The flow rate is about 2 mL per minute. The chromatograph is programmed as follows.

Time      SolutionA   Solution B
(min)        (%)             (%)
0–12        100             0
12–20     100-0        0-100
20–22        0            100
22–23      0-100       100-0
23–30      100            0
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6楼2008-07-24 09:20:53
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