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脂质体制备,过滤遇到问题 已有1人参与
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不知道是不是属于纳米范畴,现在在做脂质体 请教大侠, 现在按Biacor (SPR仪器公司)的要求制作脂质体,用的是Avanti提供的lipid,滤膜和小过滤设备。 实验要求50nm滤膜,但我做的脂质体很难通过。给多大压力都不通过,压力过大膜就破掉了。 本实验步骤如下: 称取76mg POPC溶于10ml氯仿, 旋转蒸发蒸出氯仿,然后真空泵旋蒸2h。 得到的一层薄膜用缓冲溶液溶解,混悬, 放到液氮里冷冻,再解冻,反复5次。 混悬液用注射器在过滤装置上透过50nm滤膜。 此时遇到问题,因为50nm根本过不去,我就先用100nm膜过滤,但还是过不去。像堵住了一样,使劲推也不进行最后膜就破掉了。 1.以为是脂质体体积太大了,我就将混悬液稀释了3倍。 2.想让脂质体均匀,我又用超声波超声了5min 但结果无济于事。 请有经验的大侠们告诉我一下,以上步骤是不是哪儿出了问题。或者该怎么做才对,谢谢大家! |
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