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坐等大神解图,4个问题每题15分。高金币加急悬赏!ptt5瞬时转染HEK293E和CHO细胞
如图:我在目的序列的N短加入了IgG信号肽,共54bp,也以用软件分析过信号肽。质粒用的是瞬转常见的PTT5,用于293E细胞的工程质粒,因CHO细胞对载体要求不高,问题如下:
1 从图中能够看出两种不同的细胞的蛋白表达特点吗?
2 红色框中CHO细胞裂解液中大量蛋白是怎么回事,其中NC为未转染的细胞裂解液
3 红色箭头所指为是糖蛋白修饰的目的蛋白,其中可以看出蛋白含量依次为细胞碎片>细胞裂解上清>细胞上清,其中SDS几乎肉眼不可见
4 本人曾大量瞬转后得到细胞上清中的目的蛋白,在还原条件下WB得到一条单一条带,为什么细胞碎片中还原条件下是三条带,非还原是一条弥散的带?是否与其细胞器内糖基化有关?
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