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ypan

木虫 (著名写手)

[交流] PCR反应问题

做PCR反应为什么在循环结束后要有5min延伸反应？

[ Last edited by 350784478 on 2009-7-14 at 10:35 ]
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1楼 2008-07-20 21:24:02
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yaoyaochong

银虫 (正式写手)
★ ★ ★
reasonspare(金币+3,VIP+0):谢谢分享，欢迎常来
因为在前边的循环过程中，有的延伸不完全，所以在做后一个循环结束有，给一个重组的完全延伸时间，让所有PCR片段延伸完全，我师兄是这样教我的，你可以采用5分钟，或者10分钟，都可以，
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2楼2008-07-21 09:46:00
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huang1962

银虫 (小有名气)
楼上的完全正确。
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3楼2008-07-21 16:29:23
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biodoudou

木虫 (正式写手)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):积极交流奖
恩啊，我们都是10分钟……
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4楼2008-07-21 17:21:05
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signal023

荣誉版主 (知名作家)

No stupid question, no q .

优秀版主
引用回帖:
Originally posted by yaoyaochong at 2008-7-21 09:46:
因为在前边的循环过程中，有的延伸不完全，所以在做后一个循环结束有，给一个重组的完全延伸时间，让所有PCR片段延伸完全，我师兄是这样教我的，你可以采用5分钟，或者10分钟，都可以，

说的很好，不过我一般用7min
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欢迎常来“出国留学区”！
5楼2008-07-22 13:58:27
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GeminiRR

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by ypan at 2008-7-20 21:24:
做PCR反应为什么在循环结束后要有5min延伸反应？

正解，不过10分钟好一点。。
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6楼2008-07-24 16:42:31
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angel475

无虫 (初入文坛)
我们做的也是10分钟好一些
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oye
7楼2008-07-24 18:06:37
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xuqiaoqing

新虫 (初入文坛)
5－10分钟都可以，是为了加A，做TA克隆时，与载体上的T配对，容易连接。
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8楼2008-07-24 21:27:47
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Frank2007198

铜虫 (小有名气)
我用的是7分钟
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9楼2008-07-24 21:55:01
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huangteyue

铜虫 (初入文坛)
7min 10min 都用过，感觉效果差距不大；
扩增片段长的话，延伸时间长点好。
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10楼2008-07-25 10:20:11
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