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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 测蛋白质含量
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zhlj1019

木虫 (小有名气)

[交流] 测蛋白质含量

999ug/ml牛血清白蛋白量分别为  0 ,   0.1 ,  0.2 ,  0.4,   0.6,   0.8,    1ml,
蒸馏水分别                        1 ,   0.1 ,  0.2 ,  0.6,   0.4,   0.2,    0ml
分别从各管吸取溶液0.1ml+考马斯亮蓝G-250 5ml,放置2min用10mm比色皿在595nm下比色,制标准曲线.
样品0.1+考马斯亮蓝G-250 5ml,放置2min用10mm比色皿在595nm下测吸光度.
样品吸光度为-0.1,不同样品都是-0.1,有时标线中也有个别点吸光度为-0.1.是什么原因?放置时间是不是有影响?还是紫外分光光度计有问题?还请大家指教!!!

[ Last edited by zhlj1019 on 2008-7-21 at 18:24 ]
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1楼 2008-07-20 13:48:31
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huang1962

银虫 (小有名气)
这种标线的浓度，应用肉眼就可以看出颜色不同。如果没有的就话，就是试剂有问题，否则分光光度计有问题。
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3楼2008-07-21 16:25:59
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kids0418

新虫 (初入文坛)
蒸馏水分别                     1 ,   0.1 ,  0.2 ,  0.6,   0.4,   0.2,    0ml
应该是这样的                         0.9     0.8   0.4    0.6    0.8     1
你的标准曲线测得没什么问题吧，是不是测样品的杯子没有弄干净，另外还有一个情况就是你的样品浓度太低了，再多取一点，试下，加完样品需要再用蒸馏水补到1ml这样就与标准曲线有可比性了。
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资源共享，分享快乐
2楼2008-07-21 14:21:12
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raindrop8316

金虫 (正式写手)

颜色深浅怎么样？

考马斯亮蓝法应该会有颜色变化的。如果蓝色比较深，那应该是分光光度计的问题；如果颜色很淡，那就是你的蛋白浓度低了。
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书到用时方恨少 钱到月底不够花
4楼2008-07-21 16:27:29
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