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zhchhxiaob

金虫 (正式写手)

[交流] 求助:液相色谱的出峰顺序

我是做液相的新手!
在这请问各位虫子大侠
“我做的是分离嘧啶的混合物,混养是5个嘧啶,但是在出峰的时候只出了四个峰,用的是甲醇和磷酸二氢钠缓冲盐,配比是5比95,调不同的PH做流动相,暂时只做了PH=2.5和3.0的。出了四个峰是不是说明有两个个物质的峰重贴在一起?还有怎样才能判断这四个峰所对应的物质呢?”
根据单标,可是知道各个物质的出峰顺序,但是一混合了出峰顺序还是单标的一样吗?如果改变了,怎么样才能去判断各个峰所对应的峰呢?
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kenshin520

木虫 (著名写手)

拉风家族族长

★ ★
wingcat(金币+1,VIP+0):谢谢
zhchhxiaob(金币+1,VIP+0):高手
1.波长一般查文献可以知道,如果不知道就用紫外可见分光光度计扫描一下就可以了
2.流动相是最重要的,根据文献先试试,不行再自己配比,如果你用的是反相,峰分不开,就用甲醇或者乙腈与水配比降低流动相的极性,这样有利于分开重叠的峰

然后就是配溶液的时候一定要纯,要准

先就这些了 o(∩_∩)o...
吟(淫)得一首(手)好诗(湿)容易,难的是吟(淫)得一辈子(被子)好诗(湿)
7楼2008-07-19 18:31:01
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270000739

金虫 (正式写手)

★ ★
wingcat(金币+1,VIP+0):谢谢
zhchhxiaob(金币+1,VIP+0):谢谢
两种可能~
一:检测波长有问题,扫描一下波长
二:峰重叠
一般混标应该不影响线性
世事沧桑如梦.人生几度秋凉.夜来花落满回廊.依然透骨生香.
2楼2008-07-18 22:24:14
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一帘忧梦

银虫 (正式写手)

你为什么不把标准品混合进样呢?如果你进样5个,出峰4个说明你的色谱条件不是最佳。根据单表来估计优化色谱条件。
3楼2008-07-19 00:30:11
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一帘忧梦

银虫 (正式写手)

至于你要判断那个峰是那个样品。你不是单个进过样了么?根据紫外判断啊。
4楼2008-07-19 00:31:18
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