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关松荫《土壤酶及其研究法》中磷酸酶活测定中的一点困惑已有2人参与
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在根据关松荫的方法测磷酸酶活的时候，采用磷酸苯二钠比色法1，实验原理是根据苯酚与氯代二溴对苯醌亚胺试剂反应显色，但是我按照观松荫方法实验并没显色，做标准曲线时是一条水平线。求解释，求解决方法。 |
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10楼2015-06-18 09:44:42
calorimetry
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3楼2015-06-01 13:10:17
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不是没有酶活性。 根据关松荫的方法，我测土壤磷酸酶的活性。采用磷酸苯二钠比色法1.原理是磷酸苯二钠在磷酸酶的酶促反应下产生酚，酚与显色剂2，6-二溴苯醌氯酰亚胺反映显色。做标准曲线时不同浓度的酚与显色剂反应，显色，比色，得到与浓度相应的吸光度值。现在的问题是在做标准曲线时，该有的显色没有，比色时，不同浓度的酚溶液，吸光度值一样。所以样品测量就进行不下去。 之后我又用了关松荫的磷酸苯二钠比色法二，主要区别就是显色剂改了，在做标准曲线时，显色明显，但是比色时吸光度变化很快，因而测出的值没有意义。在较长一段时间内（一天），颜色变化从红变黄再变绿。 这是我毕业论文的一部分，都快愁死了，很需要帮助，请前辈赐教。 |
4楼2015-06-01 18:01:28
calorimetry
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5楼2015-06-02 12:06:31