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mofang6985

[交流] 求助C18柱子RP-HPLC分离4kd多肽的条件【有效期至2008年7月31日】

样品是从E.coli中提取的融合蛋白,亲和层析后酶切掉GST标签,然后用RP-HPLC分析,最后上制备HPLC。

我用的是C18柱子(4.6X250mm),目前的流动相是A:ACN90%,0.05%TFA
B:ACN2%,0.05TFA。流速1ml/min.

目前尝试了各种梯度,但是样品在柱子上几乎不保留,绝大部分2分多钟就都从柱子上冲下来了,请有经验的朋友们指点。

[ Last edited by mofang6985 on 2008-7-17 at 16:08 ]

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liuzhaomin

金虫 (著名写手)

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mofang6985(金币+30,VIP+0):多谢。 7-6 07:20
我做的是一1kd的多肽 用的Agilent Zorbax XDB-C8柱(4.6*150mm,5微米)
流动相是:A:0.01%甲酸 B:甲醇 A:B=20:80
保留时间大约为1min左右  
可考虑将乙腈换成甲醇 然后调整A、B两相的比例
2楼2008-11-06 12:48:01
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