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求助C18柱子RP-HPLC分离4kd多肽的条件【有效期至2008年7月31日】
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样品是从E.coli中提取的融合蛋白，亲和层析后酶切掉GST标签，然后用RP-HPLC分析，最后上制备HPLC。 我用的是C18柱子（4.6X250mm），目前的流动相是A：ACN90%，0.05%TFA B：ACN2%，0.05TFA。流速1ml/min. 目前尝试了各种梯度，但是样品在柱子上几乎不保留，绝大部分2分多钟就都从柱子上冲下来了，请有经验的朋友们指点。 [ Last edited by mofang6985 on 2008-7-17 at 16:08 ] |
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