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chengpeng

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】 关于聚丙烯酰胺GPC测定

水溶性的聚丙烯酰胺能

通过水相GPC(聚乙二醇标样)测出分子量吗?

如果能,对GPC的柱子有什么要求?
[search]关于聚丙烯酰胺GPC测定[/search]



求助结束

[ Last edited by chengpeng on 2009-2-18 at 16:32 ]
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tiedexin

铜虫 (著名写手)

★ ★ ★
chengpeng(金币+3,VIP+0):谢谢参与。
一般最好用聚丙烯酰胺的标样才比较好。我做过这方面的测试,用的是聚丙烯酸纳的标样,得到的分子量明显偏低。你用聚乙二醇标样也许会好点,因为都是非离子的聚合物。我想你最好用多聚糖的柱子,waters公司买的就有。 用他们的ultrahydrogel 系列的柱子也可以。
2楼2008-07-11 20:50:39
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chengpeng

木虫 (正式写手)

我们毕业的师兄说:

聚乙二醇标样,测聚丙烯酰胺(低分子量,几千)的分子量,测不出。

有这种可能吗?
3楼2008-07-11 22:12:01
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tiedexin

铜虫 (著名写手)


chengpeng(金币+1,VIP+0):谢谢 2-18 16:31
有可能

我原来也测试过
4楼2008-07-14 09:43:12
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tiedexin

铜虫 (著名写手)

★ ★ ★
chengpeng(金币+3,VIP+0):非常感谢
一般测试分子量的范围和你的柱子有关也和你的标样的分子量有关。柱子填料空隙尺寸会影响你的分子量测的范围,一般你买柱子的时候会有说明。而GPC测样是通过标准曲线比对的,所以测试的分子量的范围就是你标样的最大和最小分子量。当然还有你选择的流动相不合适的话也是不出峰的。
5楼2008-07-14 13:48:28
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male7151

木虫 (小有名气)


wellok101(金币+1,VIP+0):鼓励交流
楼上的说的对,使用标准样品的话,测试的就是相对分子量,那么就和样品形态结构有很大关系了;再一个就是色谱柱了,一要是水相柱,而要与你测试样品的分子量符合的比较好,不是色谱柱的分离范围越大越好的。你可以试试GPC+光散射检测器对方法或者选择一根水相的分子量范围在100-3K的色谱柱试试。
6楼2008-07-28 11:46:42
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male7151

木虫 (小有名气)

★ ★
chengpeng(金币+2,VIP+0):谢谢你的参与
Waters的柱子能做聚丙烯酰胺吗?我觉得不能吧?聚丙烯酰胺很难做的,一般会粘在柱子里不出来,也就是与凝胶填料键合了。所以我们都推荐用场流分离仪FFF来测试聚丙烯酰胺PAM样品。FFF不需要填料/固定相,因此能很好地分离&分析PAM。
另外,WATERS的工程师对PAM了解吗?PAM溶解就是一个大难题,需要加入一些盐或者酸来解除样品分子间的蒂和Aggregation。而加入什么样的盐/酸,则需要根据PAM样品的具体情况而定了,很复杂的。
对PAM,最好用毛细管粘度仪测试特性粘度,再计算粘均分子量,这个方法比较便宜。不过,即使这样也需要很好地溶解样品!
7楼2008-08-06 16:02:36
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tiedexin

铜虫 (著名写手)


chengpeng(金币+1,VIP+0):谢谢 2-18 16:27
聚丙烯酰胺溶解不是什么问题吧,我做过很多次PAM的测试,还没有遇到溶解的问题,除非你做的是几千万分子量的,如果那么大的分子量你就不能用GPC测了,测了也不准。我这里测试几千到一百万的都没啥问题。我就是用waters公司的做的PAM,只是因为标样的问题,所以测的不是很准。
8楼2008-08-27 19:59:33
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