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yixinyiyiai

新虫 (初入文坛)

[求助] 液相色谱条件中波长怎么选择? 已有8人参与

我现在在试题建立一个复杂组分的液相色谱条件,做了紫外吸收波长扫描,显示只在235nm处有个波峰,试着用含0.5%冰醋酸的水溶液-甲醇(9:1)作为流动相,PDA检测器。结果显示在235处相应的确最大,但是峰分离不好,在其他波长下,比如264,峰分离的稍微好些。请问,我该怎么确定波长呢?要综合考虑哪些方面?是我必须先找到合适的条件,先把峰分开,再考虑确定波长吗?
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crazyff12345

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先楼主要搞明白分离是最重要的,选波长仅仅是考虑到计算误差而已,换句话说一般选紫外吸收最大处,那是可以提高检测器灵敏度,这样你进样的浓度低即可,而换个波长也未尝不可。
    但是你分离不了你选个波长你要的样品的峰很高,没有什么意义,相当于你就是用放大器看了那个字而已。从你的条件看样品的极性比较大,分离起来比较困难,多探索一下条件吧,如果手里有其他柱子不行换个柱子
http://ff.a.5d6d.com/userdirs/f/d/shouxiao/attachments/forumid_27/20070928_b48e1cab0b88b5f5a7fdfvx51XwzGRr4.jpg
11楼2015-05-03 10:23:38
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查看全部 11 个回答

archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

我觉得你应该选多个波长。波长本身并不会影响分离,是因为不同的物质在不同波长下响应不同。
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
2楼2015-04-30 13:32:57
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散尽天财

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
个人觉得先确定吸收波长,至于峰能不能分开跟波长没关系,这个跟柱的极性、流动相配比、流动相PH值及流速(影响不太大)有关。
3楼2015-05-01 18:00:09
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赈早见琥珀主

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
分离和波长没有必然联系,如果选高波长但是某些杂质没有显示出来就得不偿失了。建议你还是从色谱柱,流动相等方面改善分离度比较好。
铁甲依然在
4楼2015-05-01 19:27:57
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