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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 液相色谱条件中波长怎么选择？
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yixinyiyiai

新虫 (初入文坛)

[求助] 液相色谱条件中波长怎么选择？ 已有8人参与

我现在在试题建立一个复杂组分的液相色谱条件，做了紫外吸收波长扫描，显示只在235nm处有个波峰，试着用含0.5%冰醋酸的水溶液-甲醇（9:1）作为流动相，PDA检测器。结果显示在235处相应的确最大，但是峰分离不好，在其他波长下，比如264，峰分离的稍微好些。请问，我该怎么确定波长呢？要综合考虑哪些方面？是我必须先找到合适的条件，先把峰分开，再考虑确定波长吗？
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1楼 2015-04-30 12:54:38
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crazyff12345

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先楼主要搞明白分离是最重要的，选波长仅仅是考虑到计算误差而已，换句话说一般选紫外吸收最大处，那是可以提高检测器灵敏度，这样你进样的浓度低即可，而换个波长也未尝不可。
    但是你分离不了你选个波长你要的样品的峰很高，没有什么意义，相当于你就是用放大器看了那个字而已。从你的条件看样品的极性比较大，分离起来比较困难，多探索一下条件吧，如果手里有其他柱子不行换个柱子
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http://ff.a.5d6d.com/userdirs/f/d/shouxiao/attachments/forumid_27/20070928_b48e1cab0b88b5f5a7fdfvx51XwzGRr4.jpg
11楼2015-05-03 10:23:38
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
我觉得你应该选多个波长。波长本身并不会影响分离，是因为不同的物质在不同波长下响应不同。
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
2楼2015-04-30 13:32:57
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散尽天财

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
个人觉得先确定吸收波长，至于峰能不能分开跟波长没关系，这个跟柱的极性、流动相配比、流动相PH值及流速（影响不太大）有关。
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3楼2015-05-01 18:00:09
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赈早见琥珀主

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
分离和波长没有必然联系，如果选高波长但是某些杂质没有显示出来就得不偿失了。建议你还是从色谱柱，流动相等方面改善分离度比较好。
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铁甲依然在
4楼2015-05-01 19:27:57
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