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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 凝胶电泳老出问题 求助
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ningxinfei-2007

[交流] 凝胶电泳老出问题 求助

我最近要做有关细菌的定量PCR ，先要验证细菌引物的特异性 。拿引物扩增其他几个细菌的DNA时，其中有一个细菌老是会出现和目的细菌一致的条带 但是比要检测的细菌的条带暗很多，而其余的倒是阴性，提高了退火温度，减少了循环数后还是有，今天换了引物，结果还是那个细菌有，其他的细菌都没有，请各位高手帮忙 分析一下，做得头大了
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1楼 2008-07-09 20:13:07
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dxyzoe

木虫 (正式写手)
要是把那个菌挑单克隆纯化一下，再PCR呢
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2楼2008-07-10 01:26:39
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343666605

银虫 (小有名气)
有可能被目的菌污染了，就如2楼所说的，重新挑取单个菌落，在增菌培养后进行PCR试试。
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3楼2008-07-10 08:36:20
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ningxinfei-2007

恩 我也怀疑  可惜我们这因为奥运所有的细菌培养实验都停了 实在不行的话 我只好用定量PCR的溶解曲线来判断了 谢谢各位了
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4楼2008-07-10 15:39:18
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