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永恒_99

金虫 (正式写手)

[交流] 推测一个蛋白A调控一些相关基因b，能够做哪些实验证明

最近在微生物中推测一个蛋白A调控一些相关基因b，那如何研究比较好。打算采用β-半乳糖苷酶检测其A基因敲除后对b基因转录调控的影响。下一步打算做一下A蛋白和B蛋白的体外相互作用，B蛋白是一种过氧化氢酶，是否可以通过A的有无，检测B蛋白的酶活性。同时是否还有其他的实验可以作为参考。如何形成一个比较完整的实验构思呢。
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1楼 2015-04-27 08:44:30
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匿名
本帖仅楼主可见
2楼2015-04-27 08:52:20
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xiaochong8693

木虫之王 (文坛精英)
祝福楼主万事如意了。
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3楼2015-04-27 08:55:38
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阿Q~~

至尊木虫 (文坛精英)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
路过的看了一下，帮顶，祝福好运！~~~~~~~~~~~~~~~~~~
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自强不息，厚德载物；独立精神，自由思想。
4楼2015-04-27 09:08:55
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WHABnew

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
永恒_99: 金币+1 2015-04-27 20:35:00
第一个思路ok，第二个蛋白的不行，在这个之前你能确定B的活性吗，如果本来就没有活性，加A了如果B有活性了还好说，没有的话那个A对B的活性影响就不知道，也许有用，或许只是缺少体内那种环境的某些因子；如果B有活性，加A就没了或者上调降低，说明A有用，反之，理由同上。
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5楼2015-04-27 15:53:32
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永恒_99

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by WHABnew at 2015-04-27 15:53:32
第一个思路ok，第二个蛋白的不行，在这个之前你能确定B的活性吗，如果本来就没有活性，加A了如果B有活性了还好说，没有的话那个A对B的活性影响就不知道，也许有用，或许只是缺少体内那种环境的某些因子；如果B有活性 ...

B是一种常见的过氧化氢酶，是有活性的。那么这种方法行的通吗。是否还有其他方法可以验证这一点。
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6楼2015-04-27 20:34:41
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WHABnew

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 永恒_99 at 2015-04-27 20:34:41
B是一种常见的过氧化氢酶，是有活性的。那么这种方法行的通吗。是否还有其他方法可以验证这一点。...

体内的敲除后检测B的蛋白水平和基因水平表达差异，个人觉得既然体内都已经实现了你的目的，体外不知道还有没有必要去做。另外，真要做体外可以先敲出，然后加外源蛋白A培养，如果有“直接”的作用，你就可以检查B的表达和活性了
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7楼2015-04-28 08:22:06
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