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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 农林 » 农林综合 » 有测定植物过氧化氢和超氧阴离子的方法吗
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上官冰萌

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by kethelin at 2015-04-23 09:33:48
O2-产生速率测定采用王爱国，罗广华（王爱国，罗广华．植物的超氧物自由基与羟胺反应的定量关系．植物生理学通讯，1990，(6)：55～57．）的方法，取酶提取液 lml加入 lml 65mmol／L PBS-Na(pH7．8)和 1ml l0mmol／L ...

你好，我看到有些方法不需要加乙醚，能不加吗，感觉很危险啊
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11楼2015-04-27 20:56:38
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kethelin

金虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 上官冰萌 at 2015-04-27 20:56:38
你好，我看到有些方法不需要加乙醚，能不加吗，感觉很危险啊...

我用的方法是有加，加乙醚的目的是萃取植物色素，排除干扰，有些文献也有提示用其它有机溶剂作为萃取剂，你可以参考《植物中超氧阴离子自由基测定方法的改进》这篇文章，做些预实验，试试看，用哪种有机溶剂萃取的实验效果较好。
另外做化学实验本身都是存在一定的危险性的，实验过程中要做好必要的防护，注意安全，严格按照实验规程做，一般是没问题的。
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12楼2015-04-28 09:12:00
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上官冰萌

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by kethelin at 2015-04-23 09:33:48
O2-产生速率测定采用王爱国，罗广华（王爱国，罗广华．植物的超氧物自由基与羟胺反应的定量关系．植物生理学通讯，1990，(6)：55～57．）的方法，取酶提取液 lml加入 lml 65mmol／L PBS-Na(pH7．8)和 1ml l0mmol／L ...

你好，我按照你的方法尝试做了好几次标曲，但是都失败了，最夸张的是成了负相关，前几个的浓度吸光度特别高，后面的反而下降，这是正常的吗？你那边有没有标曲什么的呢？真的不知道我错在哪一步了，等待你的回复
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13楼2015-05-04 23:41:31
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kethelin

金虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 上官冰萌 at 2015-05-04 23:41:31
你好，我按照你的方法尝试做了好几次标曲，但是都失败了，最夸张的是成了负相关，前几个的浓度吸光度特别高，后面的反而下降，这是正常的吗？你那边有没有标曲什么的呢？真的不知道我错在哪一步了，等待你的回复...

我当时测的标曲是这样的
浓度（mmol/L）        AOD530nm
0        0
5        0.068
10        0.126
15        0.171
20        0.175
30        0.331
35        0.458
40        0.514
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14楼2015-05-05 08:41:20
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上官冰萌

新虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by kethelin at 2015-05-05 08:41:20
我当时测的标曲是这样的
浓度（mmol/L）        AOD530nm
0        0
5        0.068
10        0.126
15        0.171
20        0.175
30        0.331
35        0.458
40        0.514...

今天做了标曲，还是失败了，我再想是不是我试剂配的有问题，就是对氨基苯磺酸，α-胺，盐酸羟胺，你都是用什么溶解定容的
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15楼2015-05-05 23:03:13
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kethelin

金虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 上官冰萌 at 2015-05-05 23:03:13
今天做了标曲，还是失败了，我再想是不是我试剂配的有问题，就是对氨基苯磺酸，α-胺，盐酸羟胺，你都是用什么溶解定容的...

我是2011年做的实验，时间久了具体药品怎么配有点忘了，我建议你认真看下王爱国，罗广华．植物的超氧物自由基与羟胺反应的定量关系．植物生理学通讯，1990，(6)：55～57．这篇文献，里面有关于超养阴离子测定的原理及常见问题的解释，我当时就是参考这篇文献的。
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16楼2015-05-06 09:40:14
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