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上官冰萌

新虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by kethelin at 2015-04-23 09:33:48
O2-产生速率测定采用王爱国,罗广华(王爱国,罗广华.植物的超氧物自由基与羟胺反应的定量关系.植物生理学通讯,1990,(6):55~57.)的方法,取酶提取液 lml加入 lml 65mmol/L PBS-Na(pH7.8)和 1ml l0mmol/L ...

你好,我看到有些方法不需要加乙醚,能不加吗,感觉很危险啊
11楼2015-04-27 20:56:38
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kethelin

金虫 (小有名气)

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11楼: Originally posted by 上官冰萌 at 2015-04-27 20:56:38
你好,我看到有些方法不需要加乙醚,能不加吗,感觉很危险啊...

我用的方法是有加,加乙醚的目的是萃取植物色素,排除干扰,有些文献也有提示用其它有机溶剂作为萃取剂,你可以参考《植物中超氧阴离子自由基测定方法的改进》这篇文章,做些预实验,试试看,用哪种有机溶剂萃取的实验效果较好。
另外做化学实验本身都是存在一定的危险性的,实验过程中要做好必要的防护,注意安全,严格按照实验规程做,一般是没问题的。
12楼2015-04-28 09:12:00
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上官冰萌

新虫 (小有名气)

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10楼: Originally posted by kethelin at 2015-04-23 09:33:48
O2-产生速率测定采用王爱国,罗广华(王爱国,罗广华.植物的超氧物自由基与羟胺反应的定量关系.植物生理学通讯,1990,(6):55~57.)的方法,取酶提取液 lml加入 lml 65mmol/L PBS-Na(pH7.8)和 1ml l0mmol/L ...

你好,我按照你的方法尝试做了好几次标曲,但是都失败了,最夸张的是成了负相关,前几个的浓度吸光度特别高,后面的反而下降,这是正常的吗?你那边有没有标曲什么的呢?真的不知道我错在哪一步了,等待你的回复
13楼2015-05-04 23:41:31
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kethelin

金虫 (小有名气)

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13楼: Originally posted by 上官冰萌 at 2015-05-04 23:41:31
你好,我按照你的方法尝试做了好几次标曲,但是都失败了,最夸张的是成了负相关,前几个的浓度吸光度特别高,后面的反而下降,这是正常的吗?你那边有没有标曲什么的呢?真的不知道我错在哪一步了,等待你的回复...

我当时测的标曲是这样的
浓度(mmol/L)        AOD530nm
0        0
5        0.068
10        0.126
15        0.171
20        0.175
30        0.331
35        0.458
40        0.514
14楼2015-05-05 08:41:20
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上官冰萌

新虫 (小有名气)

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14楼: Originally posted by kethelin at 2015-05-05 08:41:20
我当时测的标曲是这样的
浓度(mmol/L)        AOD530nm
0        0
5        0.068
10        0.126
15        0.171
20        0.175
30        0.331
35        0.458
40        0.514...

今天做了标曲,还是失败了,我再想是不是我试剂配的有问题,就是对氨基苯磺酸,α-胺,盐酸羟胺,你都是用什么溶解定容的
15楼2015-05-05 23:03:13
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kethelin

金虫 (小有名气)

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15楼: Originally posted by 上官冰萌 at 2015-05-05 23:03:13
今天做了标曲,还是失败了,我再想是不是我试剂配的有问题,就是对氨基苯磺酸,α-胺,盐酸羟胺,你都是用什么溶解定容的...

我是2011年做的实验,时间久了具体药品怎么配有点忘了,我建议你认真看下王爱国,罗广华.植物的超氧物自由基与羟胺反应的定量关系.植物生理学通讯,1990,(6):55~57.这篇文献,里面有关于超养阴离子测定的原理及常见问题的解释,我当时就是参考这篇文献的。
16楼2015-05-06 09:40:14
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