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做发酵产物对淀粉酶和葡萄糖苷酶抑制率实验，阳性对照抑制率为0是怎么回事
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做发酵产物对淀粉酶和葡萄糖苷酶抑制率实验，以阿卡波糖标准品为阳性对照。但是在实验时发现阳性对照的抑制率一直很低，连1%都不到，这是怎么回事？ 做预实验时用的阿卡波糖片还有30%左右的抑制率，这是怎么回事呢？下面是我实验方法。 1.原理：淀粉酶催化淀粉生成的还原糖与DNS试剂中的3,5-二硝基水杨酸反应生成棕色物质，540nm测紫外吸收 2.实验内容 （0）空白对照管：0.2ml缓冲液+0.2ml缓冲液+0.4ml淀粉+2mlDNS （1）对照管：0.2ml缓冲液+0.2ml酶（6U/ml）+0.4ml淀粉+2mlDNS （2）本底管：0.2ml阿卡波糖+0.2ml缓冲液+0.4ml淀粉+2mlDNS （3）试样管：0.2ml阿卡波糖+0.2ml酶（6U/ml）+0.4ml淀粉+2mlDNS说明：加到淀粉那里，37℃孵育10min，加DNS，100℃水浴10min终止,反应之后加15ml冰水稀释，再取1ml稀释液加4ml冰水二次稀释，540nm测吸光度。 计算公式：[1-（A3-A2）/（A1-A0）]×100% |
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2楼2015-04-18 11:20:33
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hydros
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