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静水深流106

铁虫 (初入文坛)

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虫号: 458593
注册: 2007-11-13
性别: MM
专业: 遗传育种

[交流] 组织培养实验有关试剂的配制

成分                   1升储备液用量（mg）       每升培养基取用量（ml）
20*储备液1（大量元素）
NH4NO3                         33000
KNO3                            38000
CaCl2.2H2O                   8800                            50
MgSO4.7H2O                   7400
KH2PO4                         3400
200*储备液2（微量元素）
KI                                  166
H3BO3                            1240
MnSO4.4H2O                   4460
ZnSO4.7H2O                   1720                            5
Na2MoO4.2H2O                50
CuSO4.5H2O                   5
CoCl2.6H2O                      5

200*储备液3（铁盐）
FeSO4.7H2O                   5560                            5
Na2.EDTA.2H2O                7460
200*储备液4（有机成分）
肌醇                               20000
烟酸                                  100
盐酸吡哆醇                         100                            5
盐酸硫胺素                         20
甘氨酸                            400

次氯酸纳消毒液：取30ml次氯酸纳溶液，用蒸馏水定容至100ml。现配现用。
75%的酒精：75ml的95%的酒精加水定容至95ml。
0.2％的升汞溶液：称取HgCl2 20克，加蒸馏水至4000ml。
1N 盐酸：取8.25ml的浓盐酸，加蒸馏水定容至100ml。
1N NaOH：称8g NaOH，用蒸馏水定容至200ml。

0.1mg/ml的2,4-D溶液：取25mg的2,4-D，加入少量95%的酒精和1N的NaOH溶解，再加蒸馏水定容至250ml。
0.1mg/ml 的6-BA溶液：取25mg的6-BA，用少量1N的盐酸溶解，再加蒸馏水定容至250ml。

遗传转化与GUS基因检测的试剂配制
LB培养基的配制：
将下列组分溶解在0.9L水中：
蛋白胨                            10g
酵母提取物             5g
氯化钠                            10g
如果需要用1N NaOH（10～15ml）调整pH至7.0，再补足水至1L

10ml 的10mmol/l的AS（乙酰丁香酮）母液（100x）配制：称19.6mg的AS，先溶于少量甲醇中，然后慢慢加蒸馏水定容至10ml，过滤除菌，分装成200ul/管（每组1管），使用时将200ul的AS母液加入20ml的MS液体培养基中。

50mmol/l的磷酸钠缓冲液（pH 7.0）：A液：取NaH2PO4.2H2O 3.12g溶于蒸馏水，定溶至100ml。 B液：取Na2HPO4.12H2O 7.17g溶于蒸馏水，定溶100ml。取A液39ml与B 液61ml混合，定容至400ml，调PH至7.0。

50mmol/L铁氰化钾母液：称3.295g，用蒸馏水定容至200ml
50mmol/l亚铁氰化钾母液：称4.224g ，用蒸馏水定容至200ml。

0.5mol/l EDTA母液（pH8.0）：
药品                   分子量       100ml          500ml
EDTA Na2 2H2O 372.24       18.6g          93.06g
双蒸H2O                               80ml          400ml
用NaOH调PH至8.0                   6g             10g
DdH2O定容至                      100ml          500ml

GUS检测液的配制：100mgGluc，先溶于1ml的DMF。取80ml 50mmol/l的磷酸钠缓冲液（pH 7.0），加入1ml 50mmol/L铁氰化钾、1ml 50mmol/L亚铁氰化钾和2ml 0.5mol/l EDTA（PH 8.0），再加入已溶解的Gluc，再加20ml的甲醇，混匀。（配制方法参考《现代植物生理学实验指南》p348）
将配好的GUS检测液分装于1.5ml的小管中（1ml/管，1组1管），－20°C保存备用。

鲜花保鲜及超氧物歧化酶活性测定
50mmol/l的磷酸钠缓冲液（pH 7.0）：
A：NaH2PO4.2H2O 3.12g溶于蒸馏水，定溶至100ml。
B液：Na2HPO4.12H2O 7.17g溶于蒸馏水，定溶至100ml。
取A液39ml与B 液61ml混合，定容至400ml。PH7.0。
50mmol/l的磷酸钠缓冲液（pH 7.8）：
取A液8.5ml与B 液91.5ml混合，定容至400ml。PH7.8。

SOD提取液：50 mmol/L磷酸缓冲液 [含0.1mmol/L EDTA；0.3%(w/v) Triton X-100；4%（w/v）聚乙烯聚吡咯烷酮（pvpp,polyvinylpolyrrolidone）, pH7.8]  pvpp比较难溶，多晃动几次，再静置一会，慢慢就会溶解。

14.5 mmol/L dl－甲硫氨酸：即2.163克/L，称2.163g，用蒸馏水定容至1L（较难溶，需稍微加热）。

3umol/L EDTA：每500ml中加3ul0.5mol/L的EDTA母液，用50 mmol/L磷酸缓冲液配制。
2.25mmol/L NBT（1.84克/L）：称0.092克，溶于50ml的50 mmol/L磷酸缓冲液磷酸缓冲液中。避光保存，现配现用.

60 umol/L核黄素：称2.25mg溶于100ml的50 mmol/L磷酸缓冲液中，避光保存，现配现用。
10000ppm6－BA：即0.01克/L，称25mg6-BA，先加少量酒精和1mol/L的NaOH溶解。再用蒸馏水定容至250ml。
0.25mg/ml的GA母液：称25mg的GA，先用少量95%的酒精溶解，再用水定容至100ml。

3%的8-羟基奎林（8-HQ）：难溶于水，用柠檬酸溶液配制。生成8-羟基喹林柠檬酸盐（羟基喹林：柠檬酸摩尔数比为3:1），该盐能溶于水。先将所需柠檬酸溶于50ml左右的水中，然后将所需8-羟基喹林溶于其中，不断搅拌10-20min。待溶解后再稀释至所需倍数。

1mg/ml 2，4－D：取25mg的2,4-D，加入少量95%的酒精和1N的NaOH溶解，再加蒸馏水定容至250ml。

5克/L柠檬酸溶液：称5g 柠檬酸，用蒸馏水定容至1L。
  阿斯匹林、VitC、蔗糖、葡萄糖、AgNO3 、Na2S2SO4、K2HPO4、Ca（NO3）2、 KAL(SO4)2、Nacl、水杨酸（25mg/ml）、硼酸纳、CuSO4、KNO3、MgSO4 、（NH4）2SO4、高锰酸钾、乙醇等试剂，根据各自设计的保鲜液需要，由自己配制。

叶绿素理化性质的鉴定和含量测定实验试剂

30%KOH-甲醇溶液：用250ml的烧杯称60gKOH，慢慢加入甲醇，在通风厨中进行，沸腾，不断搅拌，待完全溶解后，最后加甲醇至烧杯200ml刻度线即可。该试剂要现配现用。

6N HCl（HCl:H2O＝1:1）：等量的浓 HCl＋等量的蒸馏水。

10%醋酸：10ml的冰醋酸中加入90ml的蒸馏水。

10%氨水：10ml的氨水中加入90ml的蒸馏水。

NaCl ，石油迷（60-90。C）、丙酮，MgCO3、石英砂，醋酸铜Cu(Ac)2等试剂由学生根据具体情况添加。

植物形态解剖实验的试剂配制
1%的番红水溶液：称1g番红，溶解于100ml的蒸馏水中。
1%的碘－碘化钾溶液：碘、碘化钾各1g溶于100ml的蒸馏水中。
0.02%的硼酸溶液：0.1g硼酸溶解于500ml的蒸馏水中。
10%的蔗糖溶液：10g蔗糖用80ml的蒸馏水溶解，最后用蒸馏水定容至100ml。

土壤全磷分析实验的试剂配制
钼锑储存液：浓H2SO4（98%-99%）153ml 缓慢倒入约400ml水中，搅拌，冷却。10g钼酸铵溶解于约60℃的300ml的水中，冷却。然后将浓H2SO4溶液缓缓倒入钼酸铵溶中，再加入100ml0.5%的酒石酸锑钾溶液，最后用水稀释至1升，避光储存。此储存液含1%的钼酸铵，5.5mol/l的1/2 H2SO4 。

钼锑抗显色剂：1.5g抗坏血酸溶解于100ml的钼锑储存液中。
二硝基酚指示剂：0.2g 2,6-二硝基酚或2,4-二硝基酚溶解于1000ml水中。

5 ppm P 标准溶液： 0.4390g KH2PO4 （二级，105℃烘过2小时）溶解于200ml水中，加入5ml浓H2SO4转入1升容量瓶中，用蒸馏水定容。此为100ppm P标准溶液，可以长期保存。取此溶液稀释20倍，即为5ppmP标准溶液，只溶液不宜久存。

浓硫酸（98%-99%）
高氯酸HClO4(70-72%)
[search]试剂配制[/search]

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