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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 有关DPPH法测自由基 搞得心都揪了！大神指点一下吧~~
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飘渺尘埃

木虫 (小有名气)
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9楼: Originally posted by 咕噜咕噜苏 at 2015-04-15 10:43:00
关键直接做空白都上升，会不会是人DPPH有问题呢...

由于仪器的问题空白也可能会有啊，这个一定要做样品对照的
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成功需要的条件很多，你我只需在一个条件下努力前行
11楼2015-04-15 22:44:25
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咕噜咕噜苏

新虫 (初入文坛)
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10楼: Originally posted by 望陈莫及1984 at 2015-04-15 11:57:17
你做的到底是什么的抗氧化性？
反应机理是：氮的孤电子接受抗氧化剂的氢原子而被还原。
是不是你的样品本身就不适合做这个实验？...

茶多酚的呀~~肯定有氢原子啊~~
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12楼2015-04-20 09:33:32
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sytucom

版主 (知名作家)

日光之下，并无新事

【答案】应助回帖

我去年在做多酚DPPH的抗氧化性，也遇到DPPH为什么吸光数值，后来顺利解决了。能否麻烦你把你的具体试验操作步骤，以及每一步的浓度和用量跟我说一下，说不定可以帮上你。
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已有的事，后必再有，已行的事，后必再行。
13楼2015-04-20 09:40:52
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咕噜咕噜苏

新虫 (初入文坛)
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13楼: Originally posted by sytucom at 2015-04-20 09:40:52
我去年在做多酚DPPH的抗氧化性，也遇到DPPH为什么吸光数值，后来顺利解决了。能否麻烦你把你的具体试验操作步骤，以及每一步的浓度和用量跟我说一下，说不定可以帮上你。

DPPH浓度 0.001063（溶剂甲醇）
用比色皿在515 nm波长处进行测定，之前是混匀后测定，直至读数稳定，最近是之前混匀，静置2小时后测定。
清除率%=100%*[1-（Ax-Axo）/Ao]
Ao:2mlDPPH溶液+1ml甲醇
Ax：2mlDPPH溶液+ 1ml甲醇水溶液提物质
Axo： 2ml无水乙醇+1ml甲醇水溶液提物质
实际提取液的浓度不是很确定，不过不超过0.5μg/mL
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14楼2015-04-21 11:44:29
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sytucom

版主 (知名作家)

日光之下，并无新事
引用回帖:
14楼: Originally posted by 咕噜咕噜苏 at 2015-04-21 11:44:29
DPPH浓度 0.001063（溶剂甲醇）
用比色皿在515 nm波长处进行测定，之前是混匀后测定，直至读数稳定，最近是之前混匀，静置2小时后测定。
清除率%=100%*
Ao:2mlDPPH溶液+1ml甲醇
Ax：2mlDPPH溶液+ 1ml甲醇水溶液 ...

我想你的DPPH的浓度本来就是很低，而且你还放置两个小时以后再测量抗氧化，真担心你甲醇里面的DPPH已经没有了。
建议：DPPH现配现用，而且DPPH一旦配制好以后，速度放在-20摄氏度冷冻保存。
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已有的事，后必再有，已行的事，后必再行。
15楼2015-04-21 11:52:22
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咕噜咕噜苏

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
15楼: Originally posted by sytucom at 2015-04-21 11:52:22
我想你的DPPH的浓度本来就是很低，而且你还放置两个小时以后再测量抗氧化，真担心你甲醇里面的DPPH已经没有了。
建议：DPPH现配现用，而且DPPH一旦配制好以后，速度放在-20摄氏度冷冻保存。...

我忘了加单位了是mol/L哦~~用标品测的时候还是可以明显看得出变化的，应该不会有什么太大的问题
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16楼2015-04-21 15:32:15
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sytucom

版主 (知名作家)

日光之下，并无新事

【答案】应助回帖

引用回帖:
16楼: Originally posted by 咕噜咕噜苏 at 2015-04-21 15:32:15
我忘了加单位了是mol/L哦~~用标品测的时候还是可以明显看得出变化的，应该不会有什么太大的问题...

建议修改样品用量你试一试。2850ul DPPH 加入150ul样品跟标准样品试一试。
我的猜测是你的DPPH加入的量太少，而标品量太多，最终导致标曲上升，而不是下降。
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已有的事，后必再有，已行的事，后必再行。
17楼2015-04-21 15:54:27
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scuzwc

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

很有可能是样品本身带有的颜色及药品试剂的原因，DPPH应现配现用，且测定带有颜色的样品时应特别注意其对测试结果的干扰。降低受试物浓度再试一试。
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fooder
18楼2015-04-23 20:51:18
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