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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » 色谱峰反转
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695044365

金虫 (正式写手)

[求助] 色谱峰反转 已有4人参与

各位大侠，最近做一种离子对化合物，开始出峰为峰一较大，峰二较小，峰一在峰二之前，这段时间变为峰二在前，峰一在后。而且这两种情况交替出现，换了柱子，流动相还是这样，请问是什么引起的呢，如何改善
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1楼 2015-04-10 14:27:54
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奇缘飘雪

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
695044365(星海慧儿代发): 金币+1, 多谢回帖交流 2015-04-12 18:13:29
看看是不是因为色谱柱接反了呢？
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因为承诺，所以执着。
2楼2015-04-10 16:50:04
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695044365

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 奇缘飘雪 at 2015-04-10 16:50:04
看看是不是因为色谱柱接反了呢？

没有啊，而且色谱柱接反了应该不会改变柱子的极性吧
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3楼2015-04-11 09:59:48
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wangling1211

铜虫 (初入文坛)
★
695044365(星海慧儿代发): 金币+1, 多谢回帖交流 2015-04-12 18:13:43
看看是不是流动相与样品发生了某种反应
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4楼2015-04-11 10:43:13
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星海慧儿

荣誉版主 (职业作家)

木虫精灵

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先确定变小的色谱峰确实是峰1，
出现差异的两次实验其色谱条件完全一样吗？我指的是所有条件，加入流动相另新制的也不算完全一样的那种。
有时候有些物质的分离对流动相中的各组分的比例有严格的要求，多一点或者少一点可能就会出现顺序颠倒，
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我是超级天后：天天努力，不落人后！
5楼2015-04-12 18:16:18
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sunxingyuan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
695044365(星海慧儿代发): 金币+2, 多谢回帖交流 2015-04-16 21:15:27
色谱柱接反了不会影响出峰的顺序。
以前做过一个品种，是门冬氨酸鸟氨酸，流动相的pH变化会影响到出峰的顺序。你的流动相调pH值了吗？如果调了可能会出现这种情况。
希望有所帮助。
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6楼2015-04-13 09:30:25
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dby75423518

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
695044365(星海慧儿代发): 金币+1, 多谢回帖交流 2015-04-16 21:15:39
流动比例是否有问题，建议重新配置流动相
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7楼2015-04-14 09:43:13
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695044365

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by sunxingyuan at 2015-04-13 09:30:25
色谱柱接反了不会影响出峰的顺序。
以前做过一个品种，是门冬氨酸鸟氨酸，流动相的pH变化会影响到出峰的顺序。你的流动相调pH值了吗？如果调了可能会出现这种情况。
希望有所帮助。

资料上说的是百分之0.2%的磷酸，并没有说明调至PH为多少。0.2%的磷酸是不是酸性太强了，PH值才一点多，很多色谱柱无法承受吧
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8楼2015-04-15 16:15:50
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sunxingyuan

银虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 695044365 at 2015-04-15 16:15:50
资料上说的是百分之0.2%的磷酸，并没有说明调至PH为多少。0.2%的磷酸是不是酸性太强了，PH值才一点多，很多色谱柱无法承受吧...

色谱柱要用耐酸性的。
峰1、峰2做对照了吗？不能用峰大、峰小来判断。
也许你的化合物在容积中不稳定，或者是不同批次的。
好多东西不清楚，没法有更多的联想。
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9楼2015-04-18 09:12:04
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