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lavender_li

银虫 (小有名气)

[求助] 细胞尾静脉注射之后,老鼠为什么都死了?急死了

做过细胞尾静脉注射的各位,大家帮帮忙吧。
我最近按照研究室前辈的实验方法,尾静脉注射癌细胞,但是注射完之后老鼠抽出了几下就都死了。但是以前学姐做的时候从来没出现过这种情况,这是为什么?
具体操作方法如下:
癌细胞液皮下注射,4个星期后,取下长起来的肿瘤,把皮肤还有其他一些周围非癌组织去除掉之后,在生理盐水里面把肿瘤组织捣碎(我几乎是捣碎到只剩下纤维组织为止)。肿瘤被绞碎之后的细胞匀浆透过40μm的膜过滤一次,之后就小鼠尾静脉注射。
但是问题来了,静脉注射之后,老鼠挣扎了几秒到几分钟之后都归天了。这是为什么?
如果大家也尾静脉注射过细胞的话,大家是用什么方法,怎么处理细胞液的?
如何才能尾静脉注射细胞之后能让老鼠不死?
请大家帮帮忙,先谢过了
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yutiantyu

金虫 (小有名气)

你用机械捣碎组织肿块,可能使细胞已经破裂,同事,把生理盐水换成PBS会更加好一些,最好用胰酶笑话成单个细胞,然后进行离心收集肿瘤细胞,这样会好的。不过胰酶处理会比较慢。需要一些机械处理,如果有仪器的话,会更好。
永不言败,努力向前!
3楼2015-04-23 16:52:48
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lavender_li

银虫 (小有名气)

大家没有做过细胞小鼠尾静脉注射么?注射之前的细胞都是怎么处理的?
想听听大家的处理方法,交换一下意见。老鼠死了,我的实验完全没法进行啊
2楼2015-04-10 10:27:09
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Mr Lu

新虫 (初入文坛)

细胞浓度较高或者溶剂过分粘稠,应该是导致死亡的主要原因。
4楼2015-12-06 14:49:50
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linlindie

铁虫 (初入文坛)

如果小鼠跳了几下,是不是你注射进空气了。每次我猝死小鼠都是尾静脉打空气,很快跳几下就死啦。
5楼2015-12-07 11:08:55
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